НАЗНАЧЕНИЕ
Набор предназначен для количественного определения активности α-амилазы в биологических жидкостях в клинико-диагностических, биохимических лабораториях и научно-исследовательской практике. Набор рассчитан на 100 определений (при расходе рабочего раствора 5 мл на определение), с учетом холостых проб.
- Диапазон определяемых активностей - от 3,0 мг/(с × л) до 36,0 мг/(с × л).
- Пересчет:1 мг/(с × л) = 3,6 г/(ч × л) = 3,6 мг/(ч × мл) = 0,0036 г/(ч × мл)
- Коэффициент вариации в серии - не более 10 %.
- Чувствительность 6 на 0,001 ед. оптической плотности - не более 0,5 мг/(с × л) (640 нм).
- Допустимая погрешность определения - не более 30 %.
- Хранение набора - при температуре от плюс 2 °С до плюс 8 °С.
- Гарантийный срок годности набора - 12 месяцев со дня изготовления.
Набор предназначен для применения in vitro только квалифицированным лабораторным персоналом.
ПРИНЦИП МЕТОДА
В присутствии α-амилазы крахмал гидролизуется до производных, не дающих цветной реакции с йодом. Изменение интенсивности окрашивания йод-крахмального комплекса пропорционально активности фермента в анализируемой пробе.
Окончательная окраска реакционной смеси может быть от светло-коричневой до сине- зеленого в зависимости от активности α-амилазы.
СОСТАВ НАБОРА
- Буфер рН (7,0 ± 0,1) - 2 флакона по (50 ± 2) мл;
- фосфат натрия - (200 ± 20) ммоль/л,
- хлорид натрия - (150 ± 15) ммоль/л.
- Раствор йода 0,1 Н - 1 флакон с (10,0 ± 0,5) мл;
- йод - (12,7 ± 1,2) г/л,
- калий йодистый - (30,0 ± 1,5) г/л,
-
Раствор концентрата ингибитора - 1 флакон с (50 ± 2) мл.
-
Раствор субстрата - 1 флакон с (5,0 ± 0,5) мл.
- крахмал растворимый - (10,0 ± 0,5) мг/мл.
ОБРАЗЕЦ
Свежая сыворотка, гепаринизированная плазма, моча разведенная в 10 раз или дуоденальное содержимое, разведенное в 100 раз физиологическим раствором. Материал стабилен в течение 5 суток при температуре от плюс 2 °С до плюс 8 °С.
ОБОРУДОВАНИЕ
-
Фотометрическое оборудование, способное измерять оптическую плотность растворов при длине волны 640 (600-700) нм в диапазоне (0-1,0) ед. опт. плотности и длине оптического пути 10 мм.
-
Водяной термостат или баня, которая обеспечивает инкубацию пробирок при температуре плюс (37 ± 1) о С.
-
Колба мерная вместимостью 1000 мл, пробирки вместимостью 10 мл (согласно действующим нормативным документами).
-
Пипетки вместимостью 0,1 и 5 мл (ДСТУ EN ISO 835:2018).
ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАБОЧИХ РАСТВОРОВ
-
Субстратно-буферный раствор готовят смешиванием буфера и раствора субстрата в соотношении 24 : Полученный реагент стабилен не менее 7 дней при комнатной температуре и не менее 15 суток при температуре от плюс 2 °С до плюс 8 °С.
-
Раствор йода 0,1 Н. Пригоден к использованию. Раствор стабилен после первого вскрытия оригинальной упаковки в течение 4 недель при температуре от плюс 2 °С до плюс 8 °С. IVD
Производитель оставляет за собой право вносить изменения без предварительного уведомления. Дата последней проверки 07.11.2023
- Раствор ингибитора получают разведением содержимого флакона из Раствора концентрата ингибитора дистиллированной водой (см. примечание 3), в мерной колбе, до объема 1000 мл. Раствор устойчивый.