ПРИЗНАЧЕННЯ
Набір призначений для кількісного визначення активності α-амілази у біологічних рідинах в клініко-діагностичних, біохімічних лабораторіях і науково-дослідницькій практиці. Набір розрахований на 100 визначень (при витраті робочого розчину 5 мл на визначення), з урахуванням холостих проб.
- Діапазон визначаємих активностей - від 3,0 мг/(с × л) до 36,0 мг/(с × л).
- Перерахування:1 мг/(с × л) = 3,6 г/(год × л) = 3,6 мг/(год × мл) = 0,0036 г/(год × мл)
- Коефіцієнт варіації у серії - не більше 10 %.
- Чутливість 6 на 0,001 од. оптичної щільності – не більше 0,5 мг/(с × л) (640 нм).
- Припустима похибка визначення - не більше 30 %.
- Зберігання набору - при температурі від плюс 2 °С до плюс 8 °С.
- Гарантійний термін придатності набору - 12 місяців від дня виготовлення.
Набір призначений для застосування in vitro тільки кваліфікованим лабораторним персоналом.
ПРИНЦИП МЕТОДУ
У присутності α-амілази крохмаль гідролізується до похідних, що не дають кольорової реакції з йодом. Зміна інтенсивності фарбування йод-крохмального комплексу пропорційна активності ферменту в аналізуємій пробі.
Остаточне забарвлення реакційної суміші може бути від світло - коричневого до синьо - зеленого в залежності від активності α-амілази.
СКЛАД НАБОРУ
- Буфер рН (7,0 ± 0,1) - 2 флакони по (50 ± 2) мл;
- фосфат натрію - (200 ± 20) ммоль/л,
- хлорид натрію - (150 ± 15) ммоль/л.
- Розчин йоду 0,1 Н - 1 флакон з (10,0 ± 0,5) мл;
- йод - (12,7 ± 1,2) г/л,
- калій йодистий - (30,0 ± 1,5) г/л,
-
Розчин концентрату інгібітору - 1 флакон з (50 ± 2) мл.
-
Розчин субстрату - 1 флакон з (5,0 ± 0,5) мл
- крохмаль розчинний - (10,0 ± 0,5) мг/мл.
ЗРАЗОК
Свіжа сироватка, гепарінізована плазма, сеча розведена в 10 разів або дуоденальний вміст, розведений в 100 разів фізіологічним розчином. Матеріал стабільний протягом 5 діб при температурі від плюс 2 °С до плюс 8 °С.
ОБЛАДНАННЯ
-
Фотометричне обладнання, здатне вимірювати оптичну щільність розчинів при довжині хвилі 640 (600-700) нм у діапазоні (0-1,0) од. опт. щільності та довжині оптичного шляху 10 мм.
-
Водяний термостат або баня, яка забезпечує інкубацію пробірок при температурі плюс (37 ± 1) о С.
-
Колбa мірна місткістю 1000 мл, пробірки місткістю 10 мл (згідно з чинними нормативними документами).
-
Піпетки місткістю 0,1 та 5 мл (ДСТУ EN ISO 835:2018).
ПРИГОТУВАННЯ РОБОЧИХ РОЗЧИНІВ
-
Субстратно-буферний розчин готують змішуванням буферу і розчину субстрату в співвідношенні 24 : 1. Отриманий реагент стабільний не менше 7 днів при кімнатній температурі і не менше 15 діб при температурі від плюс 2 °С до плюс 8 °С.
-
Розчин йоду 0,1 Н. Придатний до використання. Розчин стабільний після першого розкриття оригінальної упаковки протягом 4 тижнів при температурі від плюс 2 °С до плюс 8 °С. IVD
-
Розчин інгібітору одержують розведенням вмісту флакону із Розчину концентрата інгібіторy дистильованою водою (див. примітку 3), у мірній колбі, до об'єму 1000 мл. Розчин стійкий.
