Діазотована сульфанілова кислота в присутності кофеїну утворює з прямим і непрямим білірубіном азобілірубін рожево-фіолетового кольору. Інтенсивність кольору пропорційна концентрації загального білірубіну у зразку. У відсутності офеїнового реактива в реакцію вступає тільки прямий білірубін. Концетрацію непрямого білірубіну можна визначити за різницею між загальним та прямим білірубіном.

Клінічне значення

Білірубін представляє собою продукт розпаду гемоглобіну, який транспортується від селезінки до печінки та екскретується в жовчні протоки. Гіпербілірубінемія є результатом збільшення концентрації білірубіну у плазмі.

Причини гіпербілірубінеміі: Загальний білірубін. Збільшення гемолізу, генетичні порушення, неонатальна жовтяниця, неефективний ерітропоез та лікарські препарати.

Прямий білірубін. Холестаз печінки, генетичні та гепатоклітинні порушення.

Клінічний діагноз не повинен базуватися на одному показникові, необхідно враховувати клінічні та інші лабораторні дані.

Склад набору

Реагент 1. Сульфанілова кислота - 30 mmol/l (ммоль/л), соляна кислота - 400 mmol/l (ммоль/л).
Реагент 2. Нітрит натрію - 50 mmol/l (ммоль/л).
Реагент 3. Кофеїн - 100 mmol/l (ммоль/л).
Інструкція з використання.
Сертифікат якості.

Додатковi реагенти

Стандарт білірубіну постачається окремо. Рекомендовано використовувати «СпЛ Мультикалібратор» виробництва ТОВ«ЛАБОРАТОРІЯ ГРАНУМ» для визначення загального та прямого білірубіну, «СпЛ Білірубін Калібратор» для визначення загального білірубіну.

Аналітичні характеристики

Лінійність вимірювального діапазону: 3.4-340 µmol/l (мкмоль/л). Відхилення від лінійності не перевищує 5%. Якщо отримані результати були більше, ніж межі лінійності, розведіть зразки 1:1 (в два рази) NaCl 9 g/l (г/л) та помножте результат на два.
Чутливість не менш 3.4 µmol/l (мкмоль/л).
Коефіцієнт варіації результатів визначень – не більш 5%.

Матеріал для дослідження

Сироватка або плазма крові. Досліджувані сироватки або плазми повинні бути ретельно відокремлені від формених елементів крові не пізніше, ніж через 1 h (год) після взяття крові. Уникайте використання мутних, ліпідних та гемолітичних зразків. Захищати зразки від впливу сонячного світла.

Перелік необхідного устаткування

Спектрофотометричне або колориметричне обладнання з довжиною хвилі 540 nm (нм).
Відповідні кювети з товщиною оптичного шару 1 cm (см).
Загальне лабораторне обладнання.

Підготовка реагентів

Перед використанням набір витримати при кімнатній температурі протягом 30 min (хв).

Діазосуміш (ДС): необхідно готувати безпосередньо перед роботою. Змішати Р1 та Р2 у співвідношенні 100:3.

Увага! Наявність незначного жовтого забарвлення в Діазосуміші не впливає на результати досліджень.

Р3 готовий до використання.

Умови вимірювання:

довжина хвилі 540 nm (нм)
кювета з товщиною оптичного шару 1 cm (см)
температура 15-25 ºC

Референтні величини

Грунтуючись на результатах досліджень, проведених лабораторіями, рекомендуємо користуватися нормами, приведеними нижче. Разом з тим, відповідно до правил GLP (Гарної лабораторної практики), кожна лабораторія повинна сама визначити для себе параметри норми, характерні для обстежуваної популяції.

Нормальний рівень білірубіну в сироватці або плазмі крові становить:

Білірубін загальний до 18.81 µmol/l (мкмоль/л) = 11 mg/l (мг/л)
Білірубін прямий до 4.27 µmol/l (мкмоль/л) = 2.5 mg/l (мг/л)
Перехід в додаткові одиниці: mg/l (мг/л) х 1.71 = µmol/l (мкмоль/л)

Комплектація

1	2	3
	5.012	5.013
Вміст	110 визн.	300 визн.
Р1	1 х 50 ml (мл)	1 х 100 ml (мл)
Р2	1 х 5 ml (мл)	1 х 5 ml (мл)
Р3	1 х 100 ml (мл)	1 х 270 ml (мл)