Пряме визначення ліпопротеїдів низької щільності не вимагає будь-якої попередньої обробки або центрифугування. Аналіз проводиться в два етапи: ферментативний гідроліз та окислення (реакція Триндера).

Гідроліз ефірів холестерину за допомогою холестеролестерази.

Ефір холестерину ХЕ→ Холестерин + Жирні кислоти

Холестерин ХО→ Холестенон + Н2О2

Окислення 4-аміноантипірину під дією перекису водню та пероксидази з утворенням індикатору хіноніміму.

2Н2О2 + TOOS + 4АА ПО→ Хінонінім + 4Н2О

Інтенсивність кольору пропорційна концентрації ЛПНЩ у зразку.

Клінічне значення

Ліпопротеїди низької щільності (ЛПНЩ) є основною транспортною формою холестеролу, переносячи його головним чином у вигляді ефірів холестеролу, від однієї клітинної популяції до іншої. Вважається, що показник холістерол-ЛПНЩ більше корелює з ризиком атеросклерозу, ніж рівень загального холестерину, оскільки саме ця фракція забезпечує приплив холестерину до судин і органів. В умовах патології ЛПНЩ захоплюються клітинами в стінках судин з утворенням атеросклеротичних бляшок, які звужують просвіт судин і сприяють тромбоутворенню. Підвищений рівень ЛПНЩ-холестерину можна розцінювати як високий ступінь ризику розвитку атеросклерозу та ішемічної хвороби серця.

Клінічний діагноз не повинен базуватися на одному показникові, необхідно враховувати клінічні та інші лабораторні дані.

Склад набору

Реагент 1. Буфер: PIPES - 50 mmol/l (ммоль/л); холестеринестераза ≥600 U/l (Од/л); холестериноксідаза ≥500 U/l (Од/л); каталаза ≥600 U/l (Од/л); N-етил-N-(2-гідрокси-3-сульфопропіл)-3- метилаланін (TOOS) - 2 mmol/l (ммоль/л).
Реагент 2. Буфер: PIPES - 50 mmol/l (ммоль/л); 4-аміноантипурін - 4 mmol/l (ммоль/л); пероксидаза ≥4000 U/l (Од/л).
Інструкція з використання.
Сертифікат якості.

Додатковi реагенти

Стандарт Холестерину ЛПВЩ/ЛПНЩ постачається окремо. Рекомендовано використовувати «СпЛ Калібратор Холестерину ЛПВЩ/ЛПНЩ», «СпЛ Мультикалібратор» виробництва ТОВ «ЛАБОРАТОРІЯ ГРАНУМ».

Аналітичні характеристики

Лінійність вимірювального діапазону: 0.25 - 25.8 mmol/l (ммоль/л). Відхилення від лінійності не перевищує 5%. Якщо отримані результати були більше, ніж межі лінійності, розведіть зразки 1:1 (в два рази) NaCl 9 g/l (г/л) та помножте результат на 2.
Чутливість не менш 0.25 mmol/l (ммоль/л).
Коефіцієнт варіації результатів визначень – не більш 5%.

Матеріал для дослідження

Сироватка або плазма крові. В якості антикоагулянту рекомендован гепарин або ЕДТА.Досліджувані сироватки або плазми повинні бути ретельно відокремлені від формених елементів крові не пізніше, ніж через 1 h (год) після взяття крові. Уникайте використання мутних, ліпідних та гемолітичних зразків. Стабільність зразків 6 d (доб) при 2-8 ºС. Зразки не заморожувати.

Перелік необхідного устаткування

Спектрофотометричне або колориметричне обладнання з довжиною хвилі 600 nm (нм).
Відповідні кювети з товщиною оптичного шару 1 cm (см).
Термостатична водяна баня з 37 ºC.
Загальне лабораторне обладнання.

Прим: Адаптації до напівавтоматичних і автоматичних приладів надаються за запитом.

Підготовка реагентів

Перед використанням набір витримати при кімнатній температурі протягом 30 min (хв).

Р1 та Р2 готові до використання.

Умови вимірювання:

довжина хвилі 600 (590-700) nm (нм)
кювета з товщиною оптичного шару 1 cm (см)
температура 37 ºC

Референтні величини

Ґрунтуючись на результатах досліджень, проведених лабораторіями, рекомендуємо користуватися нормами, приведеними нижче. Разом з тим, відповідно до правил GLP (Гарної лабораторної практики), кожна лабораторія повинна сама визначити для себе параметри норми, характерні для обстежуваної популяції.

1	2
Рівні
Оптимальний, mmol/l (ммоль/л)	< 2.59
Вище оптимального, mmol/l (ммоль/л)	2.6-3.35
Погранічно високий, mmol/l (ммоль/л)	3.367 – 4.144
Високий, mmol/l (ммоль/л)	> 4.144
Дуже високий, mmol/l (ммоль/л)	> 4.95