Пряме визначення ліпопротеїдів високої щільності не вимагає будь-якої попередньої обробки або центрифугування. Аналіз проводиться в два етапи: ферментативний гідроліз та окислення (реакція Триндера).

Гідроліз ефірів холестерину за допомогою холестеролестерази.

Ефір холестерину ХЕ→ Холестерин + Жирні кислоти

Холестерин + О2 ХО→ 4-холестенон + Н2О2

Окислення 4-аміноантипіріну під дією перекису водню та пероксидази з утворенням індикатору хіноніміму.

2Н2О2 + HDAOS + 4-АА ПО→ Хінонінім + 4Н2О

Інтенсивність забарвлення пропорційна концентрації холестерину ЛПВЩ у зразку.

Клінічне значення

Ліпопротеїди в крові здійснюють транспорт ліпідів, в тому числі холестеролу, від однієї клітинної популяції до іншої. На відміну від інших ліпопротеїдів, ЛПВЩ здійснюють транспорт холестерину від клітин периферичних органів (у тому числі судин серця, артерій мозку та інш.) в печінку, де холестерол переводиться в жовчні кислоти і виводиться з організму.

У жінок у середньому значення ЛПВЩ вище, ніж у чоловіків. Зниження концентрації ЛПВЩхолестерину, а також співвідношення холестерину ліпопротеїдів низької щільності до ліпопротеїдів високої щільності більше 3:1 пов'язується з підвищеним ризиком атеросклерозу. Підвищений рівень ЛПВЩ-холестеролу розглядається як антиатерогенний фактор.

Клінічний діагноз не повинен базуватися на одному показникові, необхідно враховувати клінічні та інші лабораторні дані.

Склад набору

Реагент 1. Буфер: N, N-біс (2-гідроксиетил)-2- аміноетансульфокислота - 100 mmol/l (ммоль/л); HDAOS - 0.7 mmol/l (ммоль/л); холестеринестераза ≥800 U/l (Од/л); холестериноксидаза ≥500 U/l (Од/л); каталаза ≥8300 KU/l (КОд/л); оксидаза аскорбінової кислоти ≥3000 U/l (Од/л).
Реагент 2. Буфер: N, N-біс (2-гідроксиетил) -2-аміноетансульфокислота 100 mmol/l (ммоль/л); 4- аміноантипірін - 4 mmol/l (ммоль/л); пероксидаза ≥ 30500 U/l (Од/л).
Інструкція з використання.
Сертифікат якості.

Додатковi реагенти

Стандарт Холестерину ЛПВЩ/ЛПНЩ постачається окремо. Рекомендовано використовувати «СпЛ Калібратор Холестерину ЛПВЩ/ЛПНЩ», «СпЛ Мультикалібратор» виробництва ТОВ «ЛАБОРАТОРІЯ ГРАНУМ».

Аналітичні характеристики

Лінійність вимірювального діапазону: 0.1 - 3.87 mmol/l (ммоль/л). Відхилення від лінійності не перевищує 5%. Якщо отримані результати були більше, ніж межі лінійності, розведіть зразки 1:1 (в два рази) NaCl 9 g/l (г/л) та помножьте результат на 2.
Чутливість не менш 0.1 mmol/l (ммоль/л).
Коефіцієнт варіації результатів визначень – не більш 5%.

Матеріал для дослідження

Сироватка або плазма крові. В якості антикоагулянту рекомендован гепарин або ЕДТА. Не використовувати цитрат. Досліджувані сироватки або плазми повинні бути ретельно відокремлені від формених елементів крові не пізніше, ніж через 1 h (год) після взяття крові. Уникайте використання мутних, ліпідних та гемолітичних зразків.

Стабільність зразків 7 d (доб) при 2-8 ºС, або 3 mth (міс) при заморожуванні до -20 ºC.

Перелік необхідного устаткування

Спектрофотометричне або колориметричне обладнання з довжиною хвилі 550-650 nm (нм).
Відповідні кювети з товщиною оптичного шару 1 cm (см).
Термостатична водяна баня з 37 ºC.
Загальне лабораторне обладнання.

Прим: Адаптації до напівавтоматичних і автоматичних приладів надаються за запитом.

Підготовка реагентів

Перед використанням набір витримати при кімнатній температурі протягом 30 min (хв).

Р1 та Р2 готові до використання.

Умови вимірювання:

довжина хвилі 550-650 nm (нм)
кювета з товщиною оптичного шару 1 cm (см)
температура 37 ºC

Референтні величини

Ґрунтуючись на результатах досліджень, проведених лабораторіями, рекомендуємо користуватися нормами, приведеними нижче. Разом з тим, відповідно до правил GLP (Гарної лабораторної практики), кожна лабораторія повинна сама визначити для себе параметри норми, характерні для обстежуваної популяції.

1	2	3
Ризик	Чоловіки	Жінки
Низький, mmol/l (ммоль/л)	> 1.295	> 1.554
Умовний, mmol/l (ммоль/л)	0.9065 - 1.295	1.1655 -1.554
Високий, mmol/l (ммоль/л)	< 0.9065	< 1.1655