Принцип методу
Загальний холестерин крові, утворює кольоровий комплекс, відповідно наступним реакціям
Ефіри холестерину + H2O холестеринестераза (ХЕ)→ холестерин + жирні кислоти
Холестерин + O2 холестериноксидаза (ХОД, CHOD)→ 4-холестенон + H2O2
2 H2O2 + Фенол + 4-AФ пероксидаза (ПОД, POD)→ хінонімін + 4H2O
Інтенсивність забарвлення прямо пропорційна концентрації холестерину у зразку.
Клінічне значення
Холестерин, жиророзчинна речовина, присутня в усіх тканинах організму.
Функції холестерину: входить до складу клітинних мембран, є частиною розчинних ліпопротеїнових комплексів, циркулюючих в крові і інших фізіологічних рідинах; разом з іншими речовинами його виділяють сальні залози. У печінці холестерин використовується як попередник жовчних кислот, а в статевих і надниркових залозах з нього утворюються стероїдні гормони. Крім того, він потрібний для синтезу вітаміну D, що грає роль в розвитку кісткової тканини.
Високий рівень холестерину в крові сприяє формуванню на стінках кровоносних судин бляшок холестерину, на яких легко утворюються тромби. Тому гіперхолестеринемію відносять до провідних чинників атеросклерозу.
Гіперхолестеринемія зустрічається у хворих на механічну жовтільницю, нефрит, сифіліс, гіпотеріоз, цукровій діабет, ліпоїдний нефроз, хворі на ожиріння, хронічний алкоголізм.
Зменшення концентрації холестерину спостерігається при анеміі, туберкульозі, гіпертиреозі, голодуванні, враженні ЦНС, хронічній пневмонії. Знижає рівень холестерину введення інсуліну, тестостерону.
Клінічний діагноз не повинен бути заснований тільки на одному показникові, необхідно враховувати клінічні та інші лабораторні дані.
Склад набору
- Реагент 1. Буфер:PIPES рН 6.9 - 90 mmol/l (ммоль/л); фенол - 26 mmol/l (ммоль/л); холестеринестераза - 1000 U/l (Од/л); холестериноксидаза - 300 U/l (Од/л), пероксидаза - 650 U/l (Од/л); 4-амінофеназон – 0.4 mmol/l (ммоль/л).
- Стандарт. Розчин холестерину. Точна концентрація вказана в сертифікаті якості.
- Інструкція з використання.
- Сертифікат якості.
Аналітичні характеристики
- Лінійність вимірювального діапазону: 0.25 - 20 mmol/l (ммоль/л). Відхилення від лінійності не перевищує 5%. Якщо отримані результати були більше, ніж межі лінійності, розведіть зразки 1:1 (в два рази) NaCl 9 g/l (г/л) та помножте результат на два.
- Чутливість не менш 0.25 mmol/l (ммоль/л).
- Коефіцієнт варіації результатів визначень – не більш 5%.
Матеріал для дослідження
Сироватка або плазма крові. Досліджувані сироватки або плазми повинні бути ретельно відокремлені від формених елементів крові не пізніше, ніж через 1 h (год) після взяття крові. Уникайте використання мутних, ліпідних та гемолітичних зразків. Стабільність зразків 7 d (доб) при 2-8 ºС або 3 mth (міс) при заморожуванні до -20 ºC.
Перелік необхідного устаткування
- Спектрофотометричне або колориметричне обладнання з довжиною хвилі 505 nm (нм).
- Відповідні кювети з товщиною оптичного шару 1 cm (см).
- Загальне лабораторне обладнання.
Прим: Адаптації до напівавтоматичних і автоматичних приладів надаються за запитом.
Підготовка реагентів
Перед використанням набір витримати при кімнатній температурі протягом 30 min (хв).
Всі реагенти готові до використання.
Умови вимірювання:
- довжина хвилі 505 (500-550) nm (нм)
- кювета з товщиною оптичного шару 1 cm (см)
- температура. 37 ºC / 15-25 ºC
Референтні величини
Ґрунтуючись на результатах досліджень, проведених лабораторіями, рекомендуємо користуватися нормами, приведеними нижче. Разом з тим, відповідно до правил GLP (Гарної лабораторної практики), кожна лабораторія повинна сама визначити для себе параметри норми, характерні для обстежуваної популяції.
Нормальні рівні холестерину в сироватці або плазмі крові становлять:
Значення ризику
< 5.2 mmol/l (ммоль/л) нормальне; 5.2 -6.2 mmol/l (ммоль/л) прикордонне; > 6.2 mmol/l (ммоль/л) високе
Перехід в додаткові одиниці mg/l (мг/л) х 0.00258 = mmol/l (ммоль/л)
Комплектація
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
|---|---|---|---|---|
| 4.004 | 4.005 | 4.006 | 4.007 | |
| Вміст | 100 визн. | 200 визн. | 500 визн. | 1000 визн. |
| Р1 | 1 х 100 ml (мл) | 1 х 200 ml (мл) | 1 х 500 ml (мл) | 1 х 1000 ml |
| Стандарт | 1 х 2 ml (мл) | 1 х 2 ml (мл) | 1 х 5 ml (мл) | 1 х 10 ml (мл) |