Креатинкіназа 30 (CК)

ВИКОРИСТАННЯ

Діагностичний набір для визначення активності креатинкінази, призначений для використання як для ручного аналізу (метод Sample Start та Reagent Start), так і в декількох автоматичних аналізаторах. Реагенти повинні використовуватися лише для діагностики in vitro кваліфікованим лабораторним персоналом, лише за призначенням, за відповідних лабораторних умов.

Креатинкіназа (СК) каталізує перенесення фосфатної групи між креатинфосфатом і аденозин дифосфатом (АДФ). Продукт цієї реакції є аденозинтрифосфат (АТФ) – молекулярне джерело енергії. СК є димером, що складається з двох різних субодиниць, званих М і В. Три різних ізоферменти, утворені з цих субодиниць, знаходяться в мозку і гладких м'язах (BB), скелетному м'язі (ММ) і серцевому м'язі (ММ і MB). Підвищений рівень СК, як правило, є результатом травми м'язів, інфаркту міокарда або легенів.

ПРИНЦИП МЕТОДУ

Оптимізований кінетичний метод, розроблений з урахуванням рекомендацій Міжнародної Федерації Клінічної Хімії (IFCC). Швидкість зміни оптичної щільності при λ=340 нм прямо пропорційна активності креатинкінази.

Склад набору

• 1-CK 5 х 25 мл
• 2-CK 1 х 25 мл

Реагенти при температурі 2-8 °С зберігають стабільність протягом усього терміну придатності, зазначеного на упаковці. Реагенти на борту апарату (Prestige 24i) при температурі 2-10 °C стабільні 4 тижні.

Приготування і стабільність робочого розчину. Визначення можна виконувати, користуючись окремими реактивами 1-CK і 2-CK або робочим реактивом. Для його приготування необхідно дуже обережно змішати реактиви 5 частин 1-CK і 1 частину 2-CK. Уникати утворення піни! Термін придатності робочого реактиву: 4 дні при 2-8 °C

Концентрації компонентів в тесті

1-Реагент

• буфер імідазолу 100 ммоль/л
• глюкоза 20 ммоль/л
• N-ацетилцистеїн 20 ммоль/л
• ацетат магнію 10 ммоль/л
• ЕДТК 2 ммоль/л
• NADP 2 ммоль/л
• ADP 2 ммоль/л
• AMP 5 ммоль/л
• HK > 2.5 Од/мл

2-Реагент

• diadenosinepentaphosphate 10 мкмоль/л
• глюкозо-6-фосфат-дегідрогенази (G6P-DH) > 1.5 Од/мл
• креатин фосфат 30 ммоль/л

ДОДАТКОВЕ УСТАТКУВАННЯ

• автоматичний аналізатор або фотометр, що дозволяє знімати покази при довжині хвилі 340 нм (334/365 нм); з роздільною здатністю оптичної щільності 0,0001;
• термостат на 37 °C;
• загальне лабораторне устаткування.

БІОЛОГІЧНИЙ МАТЕРІАЛ

Сироватка без слідів гемолізу. Активність CK є нестабільною і швидко втрачається при зберіганні. Зразки слід зберігати в щільно закритій посудині і захищеному від світла місці. Зразки можна зберігати до 4-8 годин при температурі 15-25 °С або 1-2 дні при температурі 2-8 °С або 1 місяць при -20 ºС. Проте, рекомендується проводити дослідження з використанням свіжозібраного біологічного матеріалу