Гама-глутамілтрансфераза 60 (ГГТ)

ВИКОРИСТАННЯ

Діагностичний набір для визначення активності γ-глутамілтрансферази, що використовується як для ручного аналізу (метод Sample Start та метод Reagent Start), так і в декількох автоматичних аналізаторах. Реагенти повинні використовуватися лише для діагностики in vitro кваліфікованим лабораторним персоналом, лише за призначенням, за відповідних лабораторних умов.

γ-глутамілтрансфераза (GGT, GGTP) є ферментом мембранним, що каталізує перенесення глутамілових груп з глутатіону на амінокислоти або пептиди. Велика кількість GGT знаходиться в органах внутрішньої секреції: нирках, печінці, жовчних шляхах, підшлунковій залозі. Незважаючи на те, що найвища активність ферменту знаходиться в нирках, підвищені концентрації GGT в сироватці найчастіше викликані хворобами печінки. У зв'язку з тим, що алкоголь індукує синтез глутамілтрансферази, визначення рівня її активності використовується для моніторингу абстиненції у пацієнтів, які лікуються від алкоголізму.

ПРИНЦИП МЕТОДУ

Метод IFCC. Кінетичний метод з L-γ-глутаміл-3-карбокси-4-нітроанілід. Швидкість утворення 5-аміно-2-нітробензоату, яка вимірюється колориметрично, прямо пропорційна активності γ-глутамілтрансферази.

Склад набору

• 1-GGT 5 х 48 мл
• 2-GGT 1 х 60 мл

Реагенти при температурі 2-8 °С зберігають стабільність протягом усього терміну придатності, зазначеного на упаковці. Реагенти на борту апарату при температурі 2-10 °C стабільні 12 тижнів. Підготовка і стабільність робочого реагенту Визначення можна виконати використовуючи окремі реактиви 1-GGT і 2- GGT або робочий реагент. Для його приготування необхідно обережно змішати реагент 1-GGT і 2-GGT у співвідношенні 4+1. Уникати утворення піни!

Стабільність робочого реагенту в темряві:

• 4 тижні при 2-8 °C
• 5 днів при 15-25 °C

Концентрації в аналізі

• Tріс (pH 8.25) 100 ммоль/л
• Гліцилгліцин 100 ммоль/л
• L-γ-глютаміл-3-карбокси-4-нітроаніліда 4 ммоль/л

ДОДАТКОВЕ ОБЛАДНАННЯ

• автоматичний аналізатор або фотометр, що дозволяє знімати показання при довжині хвилі 405 нм;
• термостат на 25 ºC, 30 ºC або 37 ºC;
• загальне лабораторне обладнання;

БІОЛОГІЧНИЙ МАТЕРІАЛ

Сироватка, ЕДТК плазма без слідів гемолізу. Не використовувати в якості антикоагулянтів цитрат, оксалат і фториди, так як вони пригнічують активність GGT! Гепарин викликає помутніння реакційної суміші! Активність GGT стабільна в зразках до 2 днів при 15-25 ºC або 1 тиждень при 2-8 ºC або 1 місяць при -25 ºC. Заморожування зразків призводить до зниження ферментативної активності. Для відновлення активності необхідно витримати зразки при кімнатній температурі від 18 до 24 годин безпосередньо перед аналізом. Проте, рекомендується проводити дослідження з використанням свіжозібраного біологічного матеріалу