ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА
У больных активными формами сифилитической инфекции в сыворотке (плазме) крови и, при некоторых формах, в спинномозговой жидкости (ликворе) появляются реагиновые антитела, специфически взаимодействующие с липоидными антигенами клеточной мембраны возбудителя заболевания T. pallidum. К регламентированным методам исследования, применяемым для диагностики сифилитической инфекции, относятся нетрепонемные тесты (НТТ) в различных модификациях, предназначенные для определения реагиновых антител с использованием кардиолипинового. антигена: VDRL-тест научно-исследовательской лаборатории венерических заболеваний (Venereal Disease Research Laboratory); РМП – реакция микропреципитации (аналог VDRL); RPR – тест быстрых плазменных реагинов (Rapid Plasma Reagin test) и другие. После успешно проведенной специфической терапии с применением антибактериальных средств у пациентов с сифилитической инфекцией наблюдается снижение содержания реагиновых антител в T. pallidum, и обычно через несколько месяцев результаты НТТ становятся отрицательными. Результаты полуколичественного определения реагиновых антител (титра антител) могут быть использованы в качестве критериев оценки эффективности антибиотикотерапии больных сифилисом, излечение и возможности снятия с клинико-диагностического наблюдения. VDRL-тест представляет собой суспензию молочно-белого цвета, при отстаивании разделяется на опалесцирующую бесцветную жидкость и осадок. белый цвет.
СОСТАВ
Антиген кардиолипиновая суспензия, содержащая кардиолипин, лецитин, холестерин, с добавлением холина хлорида, ЭДТА (стабилизатор), тиомерсал или ProClin 300 (консервант), фосфатный буферный раствор рН 6.0.
НАЗНАЧЕНИЕ
Определение ассоциированных с сифилисом реагиновых антител в образцах сыворотки (плазмы) крови или ликвора человека.
СФЕРА ПРИМЕНЕНИЯ
Для использования in vitro в клинико-диагностических лабораториях.
ПРИНЦИП МЕТОДА
Обратите внимание! Реакция микропреципитации не является строго специфической реакцией на сифилис, поскольку производится определение антител к кардиолипиновому антигену. «Антиген кардиолипиновый стабилизирован для диагностики сифилиса (VDRL-тест)», аналогом которого является реакция микропреципитации (РМП), обнаруживает реагиновые антитела в результате микроскопической флокуляции (образования хлопьев) суспензии антиген – антитело. При исследовании плазмы или инактивированной сыворотки крови больных сифилисом в реакции микропреципитации с «Антигеном кардиолипиновым стабилизированным для диагностики сифилиса (VDRL-тестом)» должна наблюдаться положительная реакция в виде образования белых агрегатов разной величины, наличие которых определяют визуально или с использованием перхоти с двукратным увеличением. Определение проводят на предметном стекле или в реакционных лунках диаметром 1-1,2 см и глубиной не менее 0,5 см планшета (пластины) из прозрачного материала. При исследовании плазмы или инактивированной сыворотки крови здоровых лиц должна наблюдаться отрицательная реакция в виде опалесценции или равномерного распределения частиц без образования агрегатов.
МЕРЫ БЕЗОПАСНОСТИ
«Антиген кардиолипиновый стабилизированный для диагностики сифилиса (VDRL-тест)» является биологически безопасным и предназначен для диагностики in vitro. Однако при проведении исследования специально обученный персонал должен соблюдать следующие правила:
- не допускать высыхания реакционной среды в лунке планшета (пластины) или на поверхности предметного стекла;
- не подвергать реагент воздействию высокой температуры или прямого солнечного света во время инкубации и хранения;
- не пипетировать растворы ртом;
- при работе использовать спецодежду и одноразовые резиновые перчатки, а также тщательно мыть руки после работы;
- не допускать проливания образцов и содержащих их растворов;
- в случае проливания образцов обработать место раствором дезинфицирующего средства в соответствии с инструкцией по применению. Материалы, c помощью которых производилась очистка, поместить в контейнер для инфицированных отходов;
- с исследуемыми образцами и контролем необходимо обращаться как с потенциально инфицированным материалом, поскольку ни один из известных методов тестирование не может гарантировать 100% обнаружения инфекционных агентов;
- утилизацию или уничтожение потенциально инфицированных отходов следует проводить в соответствии с государственными правилами и нормами, регламентирующими их утилизацию или уничтожение.
ОГРАНИЧЕНИЕ ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ МЕДИЦИНСКОГО ИЗДЕЛИЯ:
- не использовать изделие по истечении срока годности;
- не использовать изделие с нарушением герметичности упаковки;
- избегать попадания прямого солнечного света на рабочую поверхность при проведении исследования;
- не подвергать изделие воздействию высокой температуры;
- не изменять процедуру проведения исследования.
Обратите внимание! В состав «Антигена кардиолипинового стабилизированного для диагностики сифилиса (VDRL-теста)» не входят следующие дополнительные реактивы, материалы и оборудование:
- положительный контрольный образец, содержащий реагиновые антитела к антигенам T. pallidum, инактивированный;
- инактивированная отрицательная сыворотка крови от здоровых лиц;
- дозаторы пипеточные переменного объема та одноразовые наконечники к ним;
- шейкер с частотой колебаний 200 об/мин или ротатор с частотой колебаний (100±50) об/мин;
- бумага фильтровальная лабораторная;
- физраствор;
- перчатки медицинские одноразовые;
- контейнер для твердых и жидких потенциально инфицированных отходов;
- предметное стекло.
ПОДГОТОВКА ОБРАЗЦОВ
Сбор образцов крови человека проводить в соответствии с текущей практикой методом венопункции. Для исследования можно использовать образцы сыворотки крови человека (как прогретые в течение 30 минут при температуре (56±1) °С, так и непрогретые), образцы плазмы крови человека, образцы ликвора, полученные стандартными методами Образцы, содержащие агрегаты или осадок, следует освещать центрифугированием. при 1000–2000 об/мин (15 минут, 2–8 °С). Образцы следует хранить в соответствии с требованиями существующих нормативных документов. Образцы сыворотки (плазмы) крови человека с выраженным гемолизом, гиперлипидемией и бактериальным ростом испытанию не подлежат. Длительное хранение допустимо при температуре не выше минус 20 °С (замораживание/оттаивание не более 1 раза). Чтобы избежать осаждения фибрина, плазму размораживать в течение нескольких минут при температуре (39±1) С на водяной бане.
ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТА
Перед использованием «Антиген кардиолипиновый стабилизированный для диагностики сифилиса (VDRL-тест)» выдержать не менее 30 минут при комнатной температуре перемешать, осторожно переворачивая флакон не менее 30 раз до получения гомогенной суспензии.
