Антиген кардіоліпіновий стабілізований для діагностики сифілісу (VDRL-тест) №4

ЗАГАЛЬНА ХАРАКТЕРИСТИКА

У хворих на активні форми сифілітичної інфекції в сироватці (плазмі) крові та, при деяких формах, у спинномозковій рідині (лікворі) з’являються реагінові антитіла, які специфічно взаємодіють з ліпоїдними антигенами клітинної мембрани збудника захворювання T. pallidum. До регламентованих методів дослідження, що застосовуються для діагностики сифілітичної інфекції, відносяться нетрепонемні тести (НТТ) в різних модифікаціях, призначені для визначення реагінових антитіл з використанням кардіоліпінового антигену: VDRL-тест науково-дослідної лабораторії венеричних захворювань (Venereal Disease Research Laboratory); РМП − реакція мікропреципітації (аналог VDRL); RPR – тест швидких плазмових реагінів (Rapid Plasma Reagin test) та інші. Після успішно проведеної специфічної терапії із застосуванням антибактеріальних засобів у пацієнтів з сифілітичною інфекцією спостерігається зниження вмісту реагінових антитіл до T. pallidum, і зазвичай через кілька місяців результати НТТ стають негативними. Результати напівкількісного визначення реагінових антитіл (титру антитіл) можуть бути використані в якості критеріїв оцінки ефективності антибіотикотерапії хворих на сифіліс, вилікування і можливості зняття з клініко-діагностичного спостереження.VDRL-тест являє собою суспензію молочно-білого кольору, при відстоюванні розділяється на опалесцюючу безбарвну рідину і осад білого кольору.

СКЛАД

Антиген кардіоліпіновий суспензія, що містить кардіоліпін, лецитин, холестерин, з додаванням холіну хлориду, ЕДТА (стабілізатор), тіомерсал або ProClin 300 (консервант), фосфатний буферний розчин рН 6.0.

ПРИЗНАЧЕННЯ

Визначення асоційованих з сифілісом реагінових антитіл в зразках сироватки (плазми) крові або ліквору людини.

СФЕРА ЗАСТОСУВАННЯ

Для використання in vitro в клініко-діагностичних лабораторіях.

ПРИНЦИП МЕТОДУ

Зверніть увагу! Реакція мікропреципітації не є строго специфічною реакцією на сифіліс, оскільки проводиться визначення антитіл до кардіоліпінового антигену. «Антиген кардіоліпіновий стабілізований для діагностики сифілісу (VDRL-тест)», аналогом якого є реакція мікропреципітації (РМП), виявляє реагінові антитіла в результаті мікроскопічної флокуляції (утворення пластівців) суспензії антиген - антитіло. При дослідженні плазми або інактивованої сироватки крові хворих на сифіліс в реакції мікропреципітації з «Антигеном кардіоліпіновим стабілізованим для діагностики сифілісу (VDRL-тестом)» повинна спостерігатися позитивна реакція у вигляді утворення білих агрегатів різної величини, наявність яких визначають візуально або з використанням лупи з дворазовим збільшенням. Визначення проводять на предметному склі або в реакційних лунках діаметром 1-1,2 см і глибиною не менше 0,5 см планшету (пластини) з прозорого матеріалу. При дослідженні плазми або інактивованої сироватки крові здорових осіб повинна спостерігатися негативна реакція у вигляді опалесценції або рівномірного розподілу часток без утворення агрегатів.

ЗАХОДИ БЕЗПЕКИ

«Антиген кардіоліпіновий стабілізований для діагностики сифілісу (VDRL-тест)» є біологічно безпечним та призначений для діагностики in vitro. Однак під час проведення дослідження спеціально навчений персонал повинен дотримуватися наступних правил:

• не допускати висихання реакційного середовища в лунці планшета (пластини) або на поверхні предметного скла;
• не піддавати реагент впливу високої температури або прямого сонячного світла під час інкубації та зберігання;
• не піпетувати розчини ротом;
• при роботі використовувати спецодяг та одноразові гумові рукавички, а також ретельно мити руки після роботи;
• не допускати проливання зразків і розчинів, що їх містять;
• в разі проливання зразків обробити місце розчином дезінфікуючого засобу відповідно до інструкції із застосування. Матеріали, за допомогою яких проводилось очищення, помістити в контейнер для інфікованих відходів;
• з досліджуваними зразками і контролем необхідно поводитися як з потенційно інфікованим матеріалом, оскільки жоден з відомих методів тестування не може гарантувати 100 % виявлення інфекційних агентів;
• утилізацію або знищення потенційно інфікованих відходів слід проводити відповідно до державних правил і норм, що регламентують їх утилізацію або знищення.

ОБМЕЖЕННЯ ПРИ ВИКОРИСТАННІ МЕДИЧНОГО ВИРОБУ:

• не використовувати виріб після закінчення терміну придатності;
• не використовувати виріб з порушенням герметичності упаковки;
• уникати попадання прямого сонячного світла на робочу поверхню під час проведення дослідження;
• не піддавати виріб впливу високої температури;
• не змінювати процедуру проведення дослідження.

Зверніть увагу! До складу «Антигену кардіоліпінового стабілізованого для діагностики сифілісу (VDRL-тесту)» не входять наступні додаткові реактиви, матеріали та обладнання:

• позитивний контрольний зразок, що містить реагінові антитіла до антигенів T. pallidum, інактивований;
• інактивована негативна сироватка крові від здорових осіб;
• дозатори піпеточні змінного об’єму та одноразові наконечники до них;
• шейкер з частотою коливань 200 об/хв або ротатор з частотою коливань (100±50) об/хв;
• папір фільтрувальний лабораторний;
• фізіологічний розчин;
• рукавиці медичні одноразові;
• контейнер для твердих та рідких потенційно інфікованих відходів;
• предметне скло.

ПІДГОТОВКА ЗРАЗКІВ

Збір зразків крові людини проводити відповідно до поточної практики методом венопункції. Для дослідження можна використовувати зразки сироватки крові людини (як прогріті протягом 30 хвилин при температурі (56±1) °С, так і непрогріті), зразки плазми крові людини, зразки ліквору, отримані стандартними методами. Зразки, що містять агрегати або осад, потрібно освітлювати центрифугуванням при 1000-2000 об/хв (15 хвилин, 2-8 °С). Зразки потрібно зберігати відповідно до вимог існуючих нормативних документів. Зразки сироватки (плазми) крові людини з вираженим гемолізом, гіперліпідемією і бактеріальним ростом випробуванню не підлягають. Тривале зберігання допустимо при температурі не вище мінус 20 °С (заморожування/ відтавання не більше 1 разу). Щоб уникнути осадження фібрину, плазму розморожувати протягом декількох хвилин при температурі (39±1) °С на водяній бані.

ПІДГОТОВКА РЕАГЕНТУ

Перед використанням «Антиген кардіоліпіновий стабілізований для діагностики сифілісу (VDRL-тест)» витримати не менше 30 хвилин при кімнатній температурі, перемішати, обережно перевертаючи флакон не менше 30 разів до отримання гомогенної суспензії.