Лактат-СпЛ 50 опред

Принцип метода

Лактат окисляется лактатоксидазой (LO) в пируват и пероксид водорода (Н2О2), который с 4-аминофеназоном (4-AP) и 4-хлорфенолом, под действием пероксидазы (POD), образуют красный хиноновый комплекс:

L-Лактат + О2 + Н2 LO→ Пироват + H2O2

2H2O2 + 4-AP + 4-Хлорфенол POD→ Хинон + H2O

Интенсивность цвета пропорциональна концентрации лактата в образце.

Клиническое значение

Лактат (молочная кислота) – продукт углеводного обмена, уровень которого в крови показывает, насколько ткани (особенно мышечная) насыщены кислородом. Анализ по определению концентрации лактата в крови проводят для выявления нарушений кровообращения, гипоксии (дефицита кислорода в тканях) и ацидоза при сердечной недостаточности и сахарном диабете. При выраженной гипоксии нарушение энергетического обмена в крови накапливается избыточное количество лактата, что приводит к изменению рН крови в кислую сторону (развивается лактатацидоз).

Лактатацидоз развивается при низкой концентрации кислорода в крови и нарушении его потребления тканями. Это может быть связано с дыхательными нарушениями, шоком, сердечной недостаточностью, инфарктом миокарда, тяжелой анемией и внутриклеточными нарушениями (изменениями митохондрий и их ферментов). При тяжелой физической нагрузке концентрация лактата в крови увеличивается в 5-10 раз.

Клинический диагноз не должен основываться на одном показателе, необходимо учитывать клинические и другие лабораторные данные.

Состав набора

1. Реагент 1. Буфер. PIPES рН 7.5 - 50 ммоль/л (ммоль/л), 4-хлорфенол - 4 ммоль/л (ммоль/л).
2. Реагент 2. Энзимы. Лактат оксидаза – 800 U/l (Ед/л), пероксидаза – 2000 U/l (Од/л), 4-аминофеназон - 0,4 ммоль/л (ммоль/л).
3. Стандарт. Водный раствор лактата. Точная концентрация указана в сертификате качества.
4. Инструкция по использованию.
5. Сертификат качества.

Аналитические характеристики

1. Линейность измерительного диапазона: 0.1 – 13.3 ммоль/л (ммоль/л). Отклонение от линейности не превышает 5%. Если полученные результаты были больше пределов линейности, разведите образцы 1:1 (в два раза) NaCl 9 g/l (г/л) и умножьте результат на два.
2. Чувствительность не менее 0.1 ммоль/л (ммоль/л).
3. Коэффициент вариации результатов определений – не более 5%.

Материал для исследования

Плазма крови. В качестве антикоагулянтов использовать ингибиторы гликолиза, например фторид/оксалат или фторид/гепарин. Без следов гемолиза. Тестируемые образцы должны быть тщательно отделены от форменных элементов крови не позднее, чем через 15 мин (мин) после взятия крови, так как клетки крови будут превращать глюкозу в молочную кислоту. После обособления, лактат будет стабильным.

Избегайте использования мутных и липидных образцов. Стабильность 8 ч (час) 20-25 ºС или 14 d (сут) 2-8 ºС.

Перечень необходимого оборудования

• cпектрофотометрическое или колориметрическое оборудование с длиной волны 505 nm (нм).
• подходящие кюветы с толщиной оптического слоя 1 cm (см).
• общее лабораторное оборудование.

Подготовка реагентов

Перед использованием набор выдержать при комнатной температуре 30 мин (мин).

Приготовление рабочего реагента РР растворите содержимое одного флакона Р2 в 10 ml (мл) Р1. Закрыть крышкой, перемешать стабильный РР 3 wk (неделя) при 2-8 °С.

Условия измерения:

• длина волны 505 (490-550) nm (нм)
• кювета с толщиной оптического слоя 1 cm (см)
• температура 37/15-25 ºC

Референтные величины

Основываясь на результатах исследований, проведённых лабораториями, рекомендуем пользоваться нормами, приведенными ниже. Вместе с тем согласно правилам GLP (Хорошей лабораторной практики), каждая лаборатория должна сама определить для себя параметры нормы, характерные для обследуемой популяции.

Нормальный уровень лактата в плазме крови составляет: 0.5-2.2 ммоль/л (ммоль/л) или 45-198 мг/л (мг/л).

Переход в дополнительные единицы: mg/l (мг/л) x 0.01123 = mmol/l (ммоль/л)

Комплектация