Принцип метода
Глюкозооксидаза (ГОД, GOD) катализирует окисление глюкозы до глюконовой кислоты. Образующийся пероксид водорода (H2O2) реагирует с фенолом и 4-аминофеназоном (4-АP) в присутствии пероксидазы (ПОД, POD) и образует хиноновый комплекс красного цвета.
β-D-люкоза + О 2 + H2O ЧАС→ Глюконовая кислота + H2O2
H2O2 + Фенол + 4-АР ПОД→ Хинон + H2O
Интенсивность окраски комплекса пропорциональна концентрации глюкозы в образце.
Клиническое значение
Глюкоза является главным источником энергии для большинства клеток организма. Инсулин способствует поступлению глюкозы в клетки. Гипергликемия является показателем заболевания диабетом. У пациентов больных диабетом возникают некоторые проблемы с синтезом инсулина.
Клинический диагноз не должен основываться только на одном показателе, необходимо учитывать клинические и другие лабораторные данные.
Состав набора
- Реагент 1. Буфер: трис рН 7.4 – 92 mmol/l (ммоль/л); фенол – 0.3 mmol/l (ммоль/л); глюкозооксидаза – 1500 U/l (Од/л); пероксидаза – 1000 U/l (Од/л); 4-аминофеназон – 2.6 ммоль/л (ммоль/л).
- Стандарт. Водный раствор глюкозы. Точная концентрация указана в сертификате качества.
- Антикоагулянт 25х. Натрий хлористый – 4.2 г/л (г/л), натрий фтористый – 0.11 g/l (г/л), ЕДТА – 0.2 g/l (г/л)
- Инструкция по использованию.
- Сертификат качества.
Аналитические характеристики
- Линейность измерительного диапазона: 1 – 30 mmol/l (ммоль/л). Отклонение от линейности не превышает 5%. Если полученные результаты были больше пределов линейности, разведите образцы 1:1 (в два раза) NaCl 9 g/l (г/л) и умножьте результат на 2.
- Чувствительность не менее 1 ммоль/л (ммоль/л).
- Коэффициент вариации результатов определений – не более 5%.
Материал для исследования
- Сыворотка, плазма крови. Тестируемые сыворотки или плазмы должны быть тщательно отделены от форменных элементов крови не позднее, чем через 1 ч после взятия крови.
- Венозная или капиллярная кровь. Используйте антикоагулянты, такие как гепарин или оксалат натрия.
- Моча случайная или суточная. Если допустимая концентрация глюкозы в образце мочи выходит за пределы измерительного диапазона, нужно развести представленный образец, используя физраствор, и полученный результат умножить на коэффициент разбавления.
- Спинномозговая жидкость. Чтобы избежать гликолиза, определять содержание глюкозы нужно не позднее чем через 3-4 часа после пункции.
Прим: Избегайте использования мутных, липидных и гемолитических образцов. Образцы стабильны в течение 3 d (сут) при 2-8 ºC, если они были приготовлены не позднее 30 мин (мин) после забора крови.
Перечень необходимого оборудования
- cпектрофотометрическое или колориметрическое оборудование с длиной волны 505 nm (нм).
- подходящие кюветы с толщиной оптического слоя 1 cm (см).
- общее лабораторное оборудование.
Прим: Адаптации к полуавтоматическим и автоматическим приборам предоставляются по запросу.
Подготовка реагентов
Перед использованием набор выдержать при комнатной температуре 30 мин (мин).
Р1 и Стандарт готовы к использованию.
Антикоагулянт. Растворите концентрат антикоагулянта в 25 раз дистиллированной водой (1 часть антикоагулянта + 24 части дистиллированной воды). Готовый раствор устойчив в течение 1 mth (мес).
Условия измерения:
- длина волны 505 (490-550) nm (нм)
- кювета с толщиной оптического слоя 1 cm (см)
- температура 37 ºC/ 15-25 ºC
Референтные величины
Основываясь на результатах исследований, проведенных лабораториями, рекомендуем пользоваться нижеприведенными нормами. Вместе с тем согласно правилам GLP (Хорошей лабораторной практики), каждая лаборатория должна сама определить для себя параметры нормы, характерные для обследуемой популяции.
Нормальные уровни глюкозы составляют:
- в сыворотке, плазме крови 3.33 - 6.1 ммоль/л (ммоль/л)
- в капиллярной (венозной) крови 2.7 - 5.7 mmol/l (ммоль/л)
- в моче случайной 0 - 1.11 mmol/l (ммоль/л)
- в суточной моче 0 - 2.78 mmol/l (ммоль/л)
- в спинномозговой жидкости 2.25 - 4.44 mmol/l (ммоль/л)
Комплектация
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
|---|---|---|---|---|---|
| 2.007 | 2.008 | 2.009 | 2.010 | 2.011 | |
| Содержимое | 100 определ. | 200 определ. | 500 определ. | 1000 определ. | 2000 озн. |
| Р1 | 1 х 100 мл (мл) | 1 х 200 мл (мл) | 1 х 500 мл (мл) | 2 х 500 мл (мл) | 4 х 500 мл (мл) |
| Стандарт | 1 х 3 мл (мл) | 1 х 3 мл (мл) | 1 х 6 мл (мл) | 1 х 12 мл (мл) | 2 х 12 мл (мл) |
| Антикоагулянт | 1 х 20 мл (мл) | 1 х 20 мл (мл) | 1 х 20 мл (мл) | 1 х 40 мл (мл) | 1 х 40 мл (мл) |