Билирубин превращается в цветной комплекс азобилирубина под влиянием диазотированной сульфаниловой кислоты в кислой среде. Из двух фракций, представленных в сыворотке крови, билирубин - глюкоромид и свободный билирубин, тесно связанный с альбумином, в этой реакции, непосредственно в водном растворе, принимает участие только прямой билирубин, в то время как свободный билирубин нужно растворить с диметилсульфоксидом (ДМСО) (определение косвенного билирубина). При определении косвенного билирубина определяется также и прямой, результаты соответствуют общему билирубину.

Интенсивность цвета пропорциональна концентрации билирубина в образце.

Клиническое значение

Билирубин представляет собой продукт распада гемоглобина, который транспортируется от селезенки в печень и экскретируется в желчные протоки. Гипербилирубинемия является результатом увеличения концентрации билирубина в плазме крови.

Причины гипербилирубинемии: Общий билирубин. Увеличение гемолиза, генетические нарушения, неонатальная желтуха, неэффективный эритропоэз и лекарственные препараты. Прямой билирубин. Холестаз печени, генетические и гепатоклеточные нарушения.

Клинический диагноз не должен основываться на одном показателе, необходимо учитывать клинические и другие лабораторные данные.

Состав набора

Реагент 1. Буфер: Сульфаниловая кислота – 30 mmol/l (ммоль/л); соляная кислота - 50 ммоль/л (ммоль/л); ДМСО – 7 mol/l (моль/л).
Реагент 2. Буфер: Сульфаниловая кислота – 30 mmol/l (ммоль/л); соляная кислота - 150 ммоль/л (ммоль/л).
Реагент 3. Нитрит натрия – 29 mmol/l (ммоль/л).
Инструкция по использованию.
Сертификат качества.

Дополнительные реагенты

Стандарт билирубина поставляется отдельно. Рекомендуется использовать СПЛ Мультикалибратор производства «Лаборатория Гранум» для определения общего и прямого билирубина, СПЛ Билирубин Калибратор для определения общего билирубина.

Аналитические характеристики

Линейность измерительного диапазона: 1.71 – 300 µmol/l (мкмоль/л). Отклонение от линейности не превышает 7%. Если полученные результаты были больше пределов линейности, разведите образцы 1:1 (в два раза) NaCl 9 g/l (г/л) и умножьте результат на два.
Чувствительность не менее 1.71 µmol/l (мкмоль/л).
Коэффициент вариации результатов определений – не более 7%.

Материал для исследования

Сыворотка или плазма крови. Тестируемые сыворотки или плазмы должны быть тщательно отделены от форменных элементов крови не позднее, чем через 1 ч после взятия крови. Избегайте использования мутных, липидных и гемолитических образцов (гемолиз изменяет уровень билирубина). Защищать образцы от воздействия солнечный свет.

Образцы стабильны при 2-8 ºC в течение 4 d (сут) или 2 mth (мес) при -20 ºC.

Перечень необходимого оборудования

cпектрофотометрическое или колориметрическое оборудование с длиной волны 555 нм (нм).
подходящие кюветы с толщиной оптического слоя 1 cm (см).
общее лабораторное оборудование.

Прим: Набор предназначен для работы на полуавтоматических и автоматических биохимических анализаторах.

Адаптации к приборам предоставляются по запросу.

Подготовка реагентов

Перед использованием набор выдержать при комнатной температуре 30 мин (мин).

Все реагенты готовы к использованию.

Условия измерения:

длина волны 555 (530-580) nm (нм)
кювета с толщиной оптического слоя 1 cm (см)
температура 15-20ºC

Референтные величины

Основываясь на результатах исследований, проведенных лабораториями, рекомендуем пользоваться нижеприведенными нормами. Вместе с тем согласно правилам GLP (Хорошей лабораторной практики), каждая лаборатория должна сама определить для себя параметры нормы, характерные для обследуемой популяции.

Нормальный уровень билирубина в сыворотке или плазме крови составляет:

общий билирубин до 18.81 µmol/l (мкмоль/л) = 11.0 mg/l (мг/л)
прямой билирубин до 4.27 µmol/l (мкмоль/л) = 2.5 mg/l (мг/л)

Переход в дополнительные единицы: mg/l (мг/л) х 1.71 = µmol/l (мкмоль/л)

Комплектация

1	2	3
	5.010	5.011
Содержимое	200 определ.	600 определ.
Р1	1 х 300 мл (мл)	1 х 900 мл (мл)
Р2	1 х 300 мл (мл)	1 х 900 мл (мл)
Р3	1 х 12 мл (мл)	1 х 32 мл (мл)