Принцип метода
Прямое определение липопротеидов низкой плотности не требует какой-либо предварительной обработки или центрифугирования. Анализ проводится в два этапа: ферментативный гидролиз и окисление (реакция Триндера).
- Гидролиз эфиров холестерина с помощью холестеролестеразы.
Эфир холестерина ХЭ → Холестерин + Жирные кислоты
Холестерин ХО → Холестенон + Н2О2
- Окисление 4-аминоантипирина под действием перекиси водорода и пероксидазы с образованием индикатора хинонимима.
2Н2О2 + TOOS + 4АА ПО → Хинониним + 4Н2О
Интенсивность цвета пропорциональна концентрации ЛПНП в образце.
Клиническое значение
Липопротеиды низкой плотности (ЛПНП) являются основной транспортной формой холестерола, перенося его главным образом в виде холестерола эфиров, от одной клеточной популяции к другой. Считается, что показатель холистерол-ЛПНП больше коррелирует с риском атеросклероза, чем уровень общего холестерина, поскольку именно эта фракция обеспечивает приток холестерина в сосуды и органы. В условиях патологии ЛПНП увлекаются клетками в стенках сосудов с образованием атеросклеротических бляшек, которые сужают просвет сосудов и способствуют тромбообразованию. Повышенный уровень ЛПНП-холестерина можно расценивать как высокую степень риска развития атеросклероза и ишемической болезни сердца.
Клинический диагноз не должен основываться на одном показателе, необходимо учитывать клинические и другие лабораторные данные.
Состав набора
- Реагент 1. Буфер: PIPES – 50 mmol/l (ммоль/л); холестеринестераза ≥600 U/l (Ед/л); холестериноксидаза ≥500 U/l (Ед/л); каталаза ≥600 U/l (Ед/л); N-этил-N-(2-гидрокси-3-сульфопропил)-3-метилаланин (TOOS) - 2 ммоль/л (ммоль/л).
- Реагент 2. Буфер: PIPES – 50 mmol/l (ммоль/л); 4-аминоантипурин - 4 ммоль/л (ммоль/л); пероксидаза ≥4000 U/l (Ед/л).
- Инструкция по использованию.
- Сертификат качества.
Дополнительные реагенты
Стандарт Холестерина ЛПВП/ЛПНП поставляется отдельно. Рекомендуется использовать «СпЛ Калибратор Холестерина ЛПВП/ЛПНП», «СпЛ Мультикалибратор» производства ООО «ЛАБОРАТОРИЯ ГРАНУМ».
Аналитические характеристики
- Линейность измерительного диапазона: 0.25 – 25.8 mmol/l (ммоль/л). Отклонение от линейности не превышает 5%. Если полученные результаты были больше пределов линейности, разведите образцы 1:1 (в два раза) NaCl 9 g/l (г/л) и умножьте результат на 2.
- Чувствительность не менее 0.25 mmol/l (ммоль/л).
- Коэффициент вариации результатов определений – не более 5%.
Материал для исследования
Сыворотка или плазма крови. В качестве антикоагулянта рекомендован гепарин или ЭДТА. Исследуемые сыворотки или плазмы должны быть тщательно отделены от форменных элементов крови не позднее чем через 1 ч (ч) после взятия крови. Избегайте использования мутных, липидных и гемолитических образцов. Стабильность образцов 6 d (сут) при 2-8 ºС. Образцы не замораживать.
Перечень необходимого оборудования
- спектрофотометрическое или колориметрическое оборудование с длиной волны 600 nm (нм).
- подходящие кюветы с толщиной оптического слоя 1 cm (см).
- термостатическая водяная баня с 37 ºC.
- общее лабораторное оборудование.
Прим: Адаптации к полуавтоматическим и автоматическим приборам предоставляются по запросу.
Подготовка реагентов
Перед использованием набор выдержать при комнатной температуре 30 мин (мин).
Р1 и Р2 готовы к использованию.
Условия измерения:
- длина волны 600 (590-700) nm (нм)
- кювета с толщиной оптического слоя 1 cm (см)
- температура 37 ºC
Референтные величины
Основываясь на результатах исследований, проведенных лабораториями, рекомендуем пользоваться нижеприведенными нормами. Вместе с тем согласно правилам GLP (Хорошей лабораторной практики), каждая лаборатория должна сама определить для себя параметры нормы, характерные для обследуемой популяции.
| 1 | 2 |
|---|---|
| Уровни | |
| Оптимальный, ммоль/л (ммоль/л) | < 2.59 |
| Выше оптимального, mmol/l (ммоль/л) | 2.6-3.35 |
| Погранично высокий, ммоль/л (ммоль/л) | 3.367 – 4.144 |
| Высокий, ммоль/л (ммоль/л) | > 4.144 |
| Очень высокий, ммоль/л (ммоль/л) | > 4.95 |
Комплектация
| 1 | 2 | 3 |
|---|---|---|
| 4.010 | 4.011 | |
| Содержимое | 100 определ. | 200 определ. |
| Р1 | 1 х 30 мл (мл) | 1 х 60 мл (мл) |
| Р2 | 1 х 10 мл (мл) | 1 х 20 мл (мл) |