При инкубации образца триглицеридов с липопротеинлипазой (ЛПЧ) происходит реакция с образованием свободного глицерина и свободных жирных кислот. Глицерин и АТФ в присутствии глицеролкиназы превращаются в глицерин-3-фосфат (Г3Ф) и аденозин-5-дифосфат (АДФ). Глицерин-3-фосфат (Г3Ф) затем окисляется в присутствии глицеринфосфатдегидрогеназы (ГФД, GPO) в дегидроксиацетонфосфате (ДАФ) и пероксид водорода (H2O2). В последней реакции перекись водорода (H2O2) реагирует с 4-аминофеназоном (4-АФ) и р-хлорфенолом в присутствии пероксидазы (POD, POD) с образованием окрашенного продукта (красного цвета):

Триглицериды + H2O ЛПЛ → глицерин + жирные кислоты

Глицерин + АТФ глицеролкиназа → Г3Ф + АДФ

Г3Ф + O2 ГФД → ДАФ + H2O2

H2O2 + 4-АФ + р-хлорофенол ПОД→ хинонимин + H2O

Интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации триглицеридов в пробе.

Клиническое значение

Триглицериды – жиры, которые снабжают энергией клетки. Они транспортируются из клеток эпителия липопротеидами в кровь. При диете с большим количеством насыщенных жиров и углеводов будет наблюдаться повышение уровня триглицеридов. Увеличение в сыворотке крови триглицеридов относительно. К примеру, при дисфункции печени, в результате гепатитов, при закупорке желчных протоков или циррозе печени, при диабете.

Клинический диагноз не должен основываться только на одном показателе, необходимо учитывать клинические и другие лабораторные данные.

Состав набора

Реагент 1. Буфер: GOOD рН 6.3 -50 ммоль/л (ммоль/л); р-хлорофенол -2 ммоль/л (ммоль/л); ЛПЛ -150000 U/l (Ед/л); глицеролкиназа – 500 U/l (Од/л); глицерол-3-оксидаза – 3500 U/l (Од/л); 4-АФ - 0.1 ммоль/л (ммоль/л); АТФ – 0.1 mmol/l (ммоль/л).
Стандарт. Раствор триглицеридов. Точная концентрация указана в сертификате качества.
Инструкция по использованию.
Сертификат качества.

Аналитические характеристики

Линейность измерительного диапазона: 0.11 – 11 mmol/l (ммоль/л). Отклонение от линейности не превышает 5%. Если полученные результаты были больше пределов линейности, разведите образцы 1:1 (в два раза) NaCl 9 g/l (г/л) и умножьте результат на два.
Чувствительность не менее 0.11 mmol/l (ммоль/л).
Коэффициент вариации результатов определений – не более 5%.

Материал для исследования

Сыворотка или плазма крови. Тестируемые сыворотки или плазмы должны быть тщательно отделены от форменных элементов крови не позднее, чем через 1 ч после взятия крови. Избегайте использования мутных, липидных и гемолитических образцов.

Триглицериды стабильны 5 d (сут) при 2-8 ºС.

Перечень необходимого оборудования

cпектрофотометрическое или колориметрическое оборудование с длиной волны 505 nm (нм).
подходящие кюветы с толщиной оптического слоя 1 cm (см).
общее лабораторное оборудование.

Прим: Адаптации к полуавтоматическим и автоматическим приборам предоставляются по запросу.

Подготовка реагентов

Перед использованием набор выдержать при комнатной температуре 30 мин (мин).

Все реагенты готовы к использованию.

Условия измерения:

длина волны 505 (490-550) nm (нм)
кювета с толщиной оптического слоя 1 cm (см)
температура 37 ºC / 15-25 ºC

Референтные величины

Основываясь на результатах исследований, проведенных лабораториями, рекомендуем пользоваться нижеприведенными нормами. Вместе с тем согласно правилам GLP (Хорошей лабораторной практики), каждая лаборатория должна сама определить для себя параметры нормы, характерные для обследуемой популяции.

Нормальный уровень триглицеридов в сыворотке или плазме крови составляет:

мужчины 0.45 – 1.8 mmol/l (ммоль/л)
женщины 0.4 – 1.5 mmol/l (ммоль/л)

Переход в дополнительные единицы mg/l (мг/л) x 0.00113 = mmol/l (ммоль/л)

Комплектация

1	2	3	4
	4.001	4.002	4.003
Содержимое	50 определ.	100 определ.	500 определ.
Р1	1 х 50 мл (мл)	1 х 100 мл (мл)	1 х 500 ml
Стандарт	1 х 1 мл (мл)	1 х 2 мл (мл)	1 х 5 мл (мл)