Аспартатамино трансфераза СпЛ (АСТ СпЛ) 600 мл - 250/125/60 опред

Принцип метода

В основе определения активности АCТ с динитрофенилгидрозином лежит метод Райтмана-Френкеля. Аспартатаминотрансфераза в присутствии а-кетоглютарата катализирует реакцию переаминирования L-аспартата с образованием пирувата. АCТ a-кетоглутарат + L-аспартат → L-глутамат+ оксалацетат → пируват

Пируват с 2,4-динитрофенилгидрозином в щелочной среде образует динитрофенилгидразон, интенсивность окраски которого пропорциональна активности АСТ и измеряется на фотометре.

Клиническое значение

АСТ – фермент, участвующий в метаболизме аминокислот в клетке. Фермент содержится в тканях сердца, печени, скелетной мускулатуре, нервной ткани и почках, в меньшей степени – в поджелудочной железе, селезенке и легких. Фермент локализуется как в цитоплазме, так и в митохондриях клеток, поэтому любое повреждение клеток приводит к увеличению его содержания (активности) в крови.

В миокарде активность АСТ в 10000 раз выше, чем в сыворотке крови. В эритроцитах АСТ содержится в количестве в 10 раз больше, чем в сыворотке крови.

Активность фермента у женщин несколько ниже, чем у мужчин. При инфаркте миокарда активность АСТ в сыворотке крови может повышаться в 2 - 20 раз, повышенную активность можно выявить еще до появления типичных признаков инфаркта на ЭКГ. Существует зависимость между размерами некроза в сердечной мышце и уровнем АСТ в сыворотке крови.

Нарастание активности может свидетельствовать как о расширении очага инфаркта, так и о вовлечении в процесс других органов и тканей, например печени. Одновременное определение активности двух аминотрансфераз (АЛТ и АСТ) является ценным диагностическим тестом. Активность АЛТ возрастает при инфаркте миокарда, но в меньшей степени, чем активность АСТ. Для уточнения диагноза производят расчет коэффициента де Ритиса: соотношение активностей АСТ/АЛТ. В норме это составляет 1.33±0.42. При инфаркте миокарда активность АЛТ увеличивается незначительно, поэтому коэффициент де Ритиса резко возрастает.

Клинический диагноз не должен основываться на одном показателе, необходимо учитывать клинические и другие лабораторные данные.

Состав набора

1. Реагент 1. Субстрат: DL-Аспартат – 100 mmol/l (ммоль/л); - кетоглютарат - 2 mmol/l (ммоль/л).
2. Реагент 2. Проявитель: 2,4-динитрофенилгидразин - 1 ммоль/л (ммоль/л).
3. Реагент 3. Натрия гидроксид 0.4 N концентрат 20х.
4. Калибратор. Раствор пирувата – 2.0 mmol/l (ммоль/л).
5. Инструкция по использованию.
6. Сертификат качества.

Аналитические характеристики

1. Линейность измерительного диапазона: 0.028 – 1.01 µkat/l (мккат/л). Отклонение от линейности не превышает 6%. Если полученные результаты были больше, чем пределы линейности, разведите образцы NaCl 9 g/l (г/л) и умножьте результат на фактор разведения.
2. Чувствительность не менее 0.028 µkat/l (мккат/л).
3. Коэффициент вариации результатов определений – не более 6%.

Материал для исследования

Сыворотка или плазма крови. Тестируемые сыворотки или плазмы должны быть тщательно отделены от форменных элементов крови не позднее, чем через 1 ч после взятия крови. Избегайте использования мутных, липидных и гемолитических образцов.

Перечень необходимого оборудования

• спектрофотометрическое или колориметрическое оборудование с длиной волны 505 nm (нм).
• подходящие кюветы с толщиной оптического слоя 1 cm (см).
• Термостатическая водяная баня с 37 ºC.
• общее лабораторное оборудование. Прим: Адаптации к полуавтоматическим и автоматическим приборам предоставляются по запросу

Подготовка реагентов

Перед использованием набор выдержать при комнатной температуре 30 мин (мин).

Р1, Р2 готовы к использованию.

Р3 развести дистиллированной водой 1:19 (в 20 раз).

Условия измерения:

• длина волны 505 (500-600) nm (нм) – кювета с толщиной оптического слоя 1 cm (см)
• температура 15-25-37 ºC

Референтные величины

Основываясь на результатах исследований, проведенных лабораториями, рекомендуем пользоваться нижеприведенными нормами. Вместе с тем согласно правилам GLP (Хорошей лабораторной практики), каждая лаборатория должна сама определить для себя параметры нормы, характерные для обследуемой популяции.

Нормальные уровни АСТ в сыворотке крови: 0.028-0.125 µkat/l (мккат/л) или 0.1-0.45 µmol/hml (мкмоль/чмл) при температуре 37 ºC.

Переход в дополнительные единицы: U/l (Од/л) х 0.01667 = µkat/l (мккат/л). µkat/l (мккат/л) х 3.6 = µmol/hml (мкмоль/чмл)

Комплектация