Окраска по Граму

Артикул производителя (REF): HP030.01
Код по НК 024:2023: 42709
ТУ У: 24.4-24607793-024:2011

Диагностический набор «Окраска по Граму» (набор «Забарвлення за Грамом») от ведущего производителя «Филисит-Диагностика» (поставщик — Labstar) предназначен для дифференциального окрашивания бактерий, исследования тонкой структуры клеточной стенки и разделения микроорганизмов на грамположительные (Гр+) и грамотрицательные (Гр-) группы в клинико-диагностических, бактериологических лабораториях и научно-исследовательской практике.

Это классическая, исторически выверенная пропись метода Грама, где в качестве завершающего контрастного красителя используется карболовый фуксин Циля. Методика обеспечивает максимально интенсивную и яркую визуализацию грамотрицательной микрофлоры, позволяя быстро идентифицировать бактерии даже при их низкой концентрации в мазке.

Основные преимущества базового набора «Окраска по Граму»:

• Оптимальная фасовка на 500 анализов: Набор рассчитан на проведение 500 исследований (при расходе каждого из рабочих растворов по 50 мкл на препарат), что делает его идеальным выбором для лабораторий со средней загрузкой.
• Классическая контрастность с фуксином Циля: Фуксин обеспечивает насыщенное, сочное розово-красное окрашивание грамотрицательных микроорганизмов, гарантируя высокую четкость морфологии бактерий под световым микроскопом.
• Высокая стабильность концентратов: Концентрированная форма карболового генцианвиолета и фуксина в ампуле защищает активные красящие вещества от преждевременного окисления и старения.
• Стабильный рабочий раствор генцианвиолета: Приготовленный рабочий раствор генцианвиолета сохраняет свои красящие свойства в течение 2 месяцев при температуре от +15 до +25 °C.
• Стандартизированное качество IVD: Соответствует государственным стандартам Украины и требованиям к медицинским изделиям для диагностики in vitro.

Принцип метода:

Метод основан на различиях в биохимическом строении клеточной стенки микроорганизмов:

1. При слабощелочной реакции клетки микроорганизмов связывают основной трифенилметановый краситель — генцианвиолет, окрашиваясь в сине-фиолетовый цвет.
2. Обработка раствором Люголя формирует в бактериальной клетке комплекс «кристаллвиолет – йодид».
3. В грамположительных бактериях за счет мощного слоя пептидогликана краситель прочно удерживается и не вымывается при кратковременной обработке 96° спиртом.
4. В грамотрицательных бактериях комплекс «кристаллвиолет – йодид» легко вымывается спиртом (за счет растворения тонкой липидной мембраны), и клетки обесцвечиваются.
5. Обесцвеченная грамотрицательная флора докрашивается карболовым фуксином в контрастный розово-красный цвет.

Интерпретация результатов микроскопии:

• Грамположительные бактерии (Гр+): окрашиваются в сине-фиолетовый (темно-синий) цвет (стафилококки, стрептококки, коринебактерии, бациллы, листерии, клостридии);
• Грамотрицательные бактерии (Гр-): окрашиваются в розово-красный цвет (кишечная палочка, нейссерии/гонококки, клебсиеллы, сальмонеллы, псевдомонады, моракселлы).

Исследуемый биоматериал:

• Биологические жидкости, экссудаты, тканевые секреты;
• Секреты и мокрота нижних дыхательных путей;
• Спинномозговая жидкость (ликвор);
• Мазки культур, выращенных на плотных и жидких питательных средах.

(Примечание: не использовать образцы, контаминированные посторонней бактериальной флорой).

Состав набора:

1. Карболовый раствор генциана фиолетового: 1 флакон (5,0 ± 0,5) мл (концентрат);
2. Раствор Люголя: 1 флакон (25 ± 1) мл (готовый к применению);
3. Карболовый раствор фуксина Циля: 1 ампула (2,5 ± 0,1) мл (концентрат);
4. Официальная инструкция по применению.

(Дополнительно требуются, но в набор не входят: 96° этиловый спирт для обесцвечивания, дистиллированная вода, фильтровальная бумага и иммерсионное масло REF HP060.01 / HP060.02).

Приготовление рабочих растворов и методика окраски:

• Рабочий генцианвиолет: к содержимому флакона с концентратом (5 мл) добавить 20 мл дистиллированной воды комнатной температуры. Встряхивать 30 секунд, выдержать 1 час перед использованием.
• Рабочий фуксин: содержимое ампулы с фуксином Циля (2,5 мл) развести в 22,5 мл дистиллированной воды (раствор готовят в небольших количествах непосредственно перед работой, так как разведенный фуксин не подлежит длительному хранению).

Порядок окрашивания мазка:

1. На фиксированный мазок положить фильтровальную бумагу, нанести 2–3 капли (50–75 мкл) рабочего раствора генцианвиолета на 2 минуты.
2. Снять бумагу и, не промывая водой, нанести 2–3 капли раствора Люголя на 1–2 минуты (до потемнения). Слить остатки.
3. Обесцветить 96° этиловым спиртом в течение 30–45 секунд (погружая препарат в спирт до прекращения отхождения фиолетовых струек). Тщательно промыть водой.
4. Нанести 2–3 капли рабочего раствора карболового фуксина на 2 минуты.
5. Слить краситель, промыть водой, высушить на воздухе и микроскопировать с масляной иммерсией.

Технические характеристики:

• Количество исследований: 500 анализов
• Форма выпуска: флаконы и запаянная стеклянная ампула с концентратом
• Температура хранения набора: от +2 до +16 °C в защищенном от света месте
• Срок годности набора: 12 месяцев от даты изготовления
• Производитель: ООО НПП «Филисит-Диагностика» (Украина)
• Официальный поставщик: Labstar

Преимущества заказа у поставщика Labstar:

• Прямые поставки сертифицированных микробиологических наборов «Филисит-Диагностика»;
• Свежие заводские партии с максимальным гарантийным сроком;
• Строгое соблюдение условий хранения (+2...+16 °C) и оперативная отгрузка;
• Выгодные оптовые и розничные цены для бактериологических лабораторий, больниц и диагностических центров.