Лактатдегидрогеназа 500 (ЛДГ)

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ

Диагностический набор для определения активности лактатдегидрогеназы, предназначен для ручного анализа (методы Sample Start и Reagent Start) и в нескольких автоматических анализаторах. Реагенты должны использоваться только для диагностики in vitro квалифицированным лабораторным персоналом, только по назначению, соответствующих лабораторных условий

Лактатдегидрогеназа (LDH, LD) является внутриклеточным ферментом находятся во всех тканях. LDH катализирует обратное преобразование лактата в пирувате с использованием NAD+ в роли кофактора. Дегидрогеназа является тетрамером, содержащим два возможных типа субъединиц: Х и М. Различают 5 изоэнзимов, названных от LD-1(Х4) до LD-5(М4). Изоэнзимы выступают в разных пропорциях в каждом виде тканей и обладают разной электрофоретической подвижностью, что и использовано в диагностике

ПРИНЦИП МЕТОДА

Метод кинетический, рекомендованный Немецким Обществом Клинической Химии (DGKC). Скорость изменения оптической плотности на длине волны =340 нм прямо пропорциональна активности лактатдегидрогеназы.

Состав набора

• 1-LDH 3 х 400 мл
• 2-LDH 1 х 300 мл

Реагенты при температуре 2-8 °С сохраняют стабильность в течение всего срока годности, указанного на упаковке. Реагенты на борту аппарата при температуре 2-10 °C стабильны 8 недель. Приготовление и стабильность рабочего раствора Определение можно выполнять, используя отдельные реактивы 1- LDH и 2-LDH или рабочим реактивом. Для его приготовления необходимо очень осторожно смешать реактивы 1-LDH и 2-LDH в соотношении 4+1. Избегать образования пены! Срок годности рабочего реактива: 5 дней при 2-8 °C 24 часа при 15-25 °C

Концентрации в тесте

• Фосфатный буфер (рH 7.5) 50 ммоль/л
• Пироват 0.6 ммоль/л
• NADH 0.25 ммоль/л
• консервант

ДОПОЛНИТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ

• автоматический анализатор или фотометр, позволяющий снимать показы при длине волны 340 нм (Hg 334 нм, 365 нм);
• термостат на 25 °С или 37 °C;
• общее лабораторное оборудование.

ОБРАЗЦЫ

Сыворотка, гепаринизированная плазма, без следов гемолиза. Не используйте гемолизованную кровь или сыворотку, поскольку эритроциты содержат в 150 раз больше активности ЛДГ, чем сыворотка. В качестве антикоагулянта для приготовления плазмы используют литиевую илиаммонийную соль гепарина. Активность LDH нестабильна и быстро теряется во время хранения. Образцы можно хранить до 4 часов при 15-25 ºC или 1-2 дня при 2-8 ºC. Тем не менее, рекомендуется проводить исследования с использованием свежесобранного биологического материала