Креатинкиназа 60 (CК)

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ

Диагностический набор для определения активности креатинкиназы, предназначен для использования как для ручного анализа (метод Sample Start и Reagent Start), так и в нескольких автоматических анализаторах. Реагенты должны использоваться только для диагностики in vitro квалифицированным лабораторным персоналом, только по назначению, соответствующих лабораторных условий

Креатинкиназа (СК) катализирует перенос фосфатной группы между креатинфосфатом и аденозин дифосфатом (АДФ) Продукт этой реакции является Аденозинтрифосфат (АТФ) – молекулярный источник энергии. СК является димером, состоящий из двух разных субъединиц, называемых М и В. Три разных изоферменты, образованные из этих субъединиц, находятся в мозге и гладких мышцах (BB), скелетной мышце (ММ) и сердечной мышце (ММ и MB). Повышенный уровень СК, как правило, является результатом травмы мышц, инфаркта миокарда или легких.

ПРИНЦИП МЕТОДА

Оптимизированный кинетический метод, разработанный с учетом рекомендаций Международной Федерации Клинической Химии (IFCC) Скорость изменения оптической плотности при λ=340 нм прямо пропорциональна активности креатинкиназы

Состав набора

• 1-CK 5 х 50 мл
• 2-CK 1 х 50 мл

Реагенты при температуре 2-8 °С сохраняют стабильность в течение всего срока годности, указанного на упаковке. Реагенты на борту аппарата (Prestige 24i) при температуре 2-10 °C стабильны 4 недели.

Приготовление и устойчивость рабочего раствора. Определение можно выполнять, используя отдельные реактивы 1-CK и 2-CK или рабочим реактивом. Для его приготовления необходимо очень осторожно смешать реактивы 5 частей 1-CK и 1 часть 2-CK. Избегать образования пены! Срок годности рабочего реактива: 4 дня при 2-8 °C

Концентрации компонентов в тесте

1-Реагент

• буфер имидазола 100 ммоль/л
• глюкоза 20 ммоль/л
• N-ацетилцистеин 20 ммоль/л
• ацетат магния 10 ммоль/л
• ЭДТК 2 ммоль/л
• NADP 2 ммоль/л
• ADP 2 ммоль/л
• AMP 5 ммоль/л
• HK > 2.5 Ед/мл

2-Реагент

• diadenosinepentaphosphate 10 мкмоль/л
• глюкозо-6-фосфат-дегидрогеназы (G6P-DH) > 1.5 Ед/мл
• креатин фосфат 30 ммоль/л

ДОПОЛНИТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ

• автоматический анализатор или фотометр, позволяющий снимать показания при длине волны 340 нм (334/365 нм); с разрешением оптической плотности 0,0001;
• термостат на 37 °C;
• общее лабораторное оборудование.

БИОЛОГИЧЕСКИЙ МАТЕРИАЛ

Сыворотка без следов гемолиза. Активность CK нестабильна и быстро теряется при хранении. Образцы следует хранить в плотно закрытом сосуде и защищенном от света месте. Образцы можно хранить до 4-8 часов при температуре 15-25 °С или 1-2 дня. при температуре 2-8 °С или 1 месяц при -20 °С. Тем не менее, рекомендуется проводить исследования с использованием свежесобранного биологического материала