Альфа-амилаза (Коровея)

НАЗНАЧЕНИЕ

Набор предназначен для количественного определения активности α-амилазы в биологических жидкостях в клинико-диагностических, биохимических лабораториях и научно-исследовательской практике. Набор рассчитан на 100 определений (при расходе рабочего раствора 5 мл на определение), с учетом холостых проб.

• Диапазон определяемых активностей - от 3,0 мг/(с × л) до 36,0 мг/(с × л).
• Пересчет:1 мг/(с × л) = 3,6 г/(ч × л) = 3,6 мг/(ч × мл) = 0,0036 г/(ч × мл)
• Коэффициент вариации в серии - не более 10 %.
• Чувствительность 6 на 0,001 ед. оптической плотности - не более 0,5 мг/(с × л) (640 нм).
• Допустимая погрешность определения - не более 30 %.
• Хранение набора - при температуре от плюс 2 °С до плюс 8 °С.
• Гарантийный срок годности набора - 12 месяцев со дня изготовления.

Набор предназначен для применения in vitro только квалифицированным лабораторным персоналом.

ПРИНЦИП МЕТОДА

В присутствии α-амилазы крахмал гидролизуется до производных, не дающих цветной реакции с йодом. Изменение интенсивности окрашивания йод-крахмального комплекса пропорционально активности фермента в анализируемой пробе.

Окончательная окраска реакционной смеси может быть от светло-коричневой до сине- зеленого в зависимости от активности α-амилазы.

СОСТАВ НАБОРА

1. Буфер рН (7,0 ± 0,1) - 2 флакона по (50 ± 2) мл;

• фосфат натрия - (200 ± 20) ммоль/л,
• хлорид натрия - (150 ± 15) ммоль/л.

2. Раствор йода 0,1 Н - 1 флакон с (10,0 ± 0,5) мл;

• йод - (12,7 ± 1,2) г/л,
• калий йодистый - (30,0 ± 1,5) г/л,

3. Раствор концентрата ингибитора - 1 флакон с (50 ± 2) мл.

4. Раствор субстрата - 1 флакон с (5,0 ± 0,5) мл.

• крахмал растворимый - (10,0 ± 0,5) мг/мл.

ОБРАЗЕЦ

Свежая сыворотка, гепаринизированная плазма, моча разведенная в 10 раз или дуоденальное содержимое, разведенное в 100 раз физиологическим раствором. Материал стабилен в течение 5 суток при температуре от плюс 2 °С до плюс 8 °С.

ОБОРУДОВАНИЕ

1. Фотометрическое оборудование, способное измерять оптическую плотность растворов при длине волны 640 (600-700) нм в диапазоне (0-1,0) ед. опт. плотности и длине оптического пути 10 мм.

2. Водяной термостат или баня, которая обеспечивает инкубацию пробирок при температуре плюс (37 ± 1) о С.

3. Колба мерная вместимостью 1000 мл, пробирки вместимостью 10 мл (согласно действующим нормативным документами).

4. Пипетки вместимостью 0,1 и 5 мл (ДСТУ EN ISO 835:2018).

ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАБОЧИХ РАСТВОРОВ

1. Субстратно-буферный раствор готовят смешиванием буфера и раствора субстрата в соотношении 24 : Полученный реагент стабилен не менее 7 дней при комнатной температуре и не менее 15 суток при температуре от плюс 2 °С до плюс 8 °С.

2. Раствор йода 0,1 Н. Пригоден к использованию. Раствор стабилен после первого вскрытия оригинальной упаковки в течение 4 недель при температуре от плюс 2 °С до плюс 8 °С. IVD

Производитель оставляет за собой право вносить изменения без предварительного уведомления. Дата последней проверки 07.11.2023

3. Раствор ингибитора получают разведением содержимого флакона из Раствора концентрата ингибитора дистиллированной водой (см. примечание 3), в мерной колбе, до объема 1000 мл. Раствор устойчивый.