Лактат окислюється лактатоксидазою (LO) в піруват та пероксид водню (Н2О2), який з 4-амінофеназоном (4-AP) та 4-хлорфенолом, під дією пероксидази (POD), утворюють червоний хіноновий комплекс:

L-Лактат + О2 + Н2 LO→ Піруват + H2O2

2H2O2 + 4-AP + 4-Хлорфенол POD→ Хінон + H2O

Інтенсивність кольору пропорційнаа концентрації лактату у зразку.

Клінічне значення

Лактат (молочна кислота) - продукт вуглеводного обміну, рівень якого в крові показує, наскільки тканини (особливо м'язова) насичені киснем. Аналіз за визначенням концентрації лактату в крові проводять для виявлення порушень кровообігу, гіпоксії (дефіциту кисню в тканинах) і ацидозу при серцевій недостатності та цукровому діабеті. При вираженій гіпоксії, порушення енергетичного обміну в крові накопичується надмірна кількість лактату, що призводить до зміни рН крові в кислу сторону (розвивається лактатацидоз).

Лактатацидоз розвивається при низькій концентрації кисню в крові та порушенні споживання його тканинами. Це може бути пов'язано з дихальними порушеннями, шоком, серцевою недостатністю, інфарктом міокарда, тяжкою анемією і внутрішньоклітинними порушеннями (змінами мітохондрій і їх ферментів). При важкому фізичному навантаженні концентрація лактату в крові підвищується в 5-10 разів.

Клінічний діагноз не повинен базуватися на одному показникові, необхідно враховувати клінічні та інші лабораторні дані.

Склад набору

Реагент 1. Буфер. PIPES рН 7.5 - 50 mmol/l (ммоль/л), 4- хлорфенол - 4 mmol/l (ммоль/л).
Реагент 2. Ензими. Лактат оксидаза - 800 U/l (Од/л), пероксидаза – 2000 U/l (Од/л), 4-амінофеназон - 0,4 mmol/l (ммоль/л).
Стандарт. Водний розчин лактату. Точна концентрація вказана в сертифікаті якості.
Інструкція з використання.
Сертифікат якості.

Аналітичні характеристики

Лінійність вимірювального діапазону: 0.1 – 13.3 mmol/l (ммоль/л). Відхилення від лінійності не перевищує 5%. Якщо отримані результати були більше, ніж межі лінійності, розведіть зразки 1:1 (в два рази) NaCl 9 g/l (г/л) та помножте результат на два.
Чутливість не менш 0.1 mmol/l (ммоль/л).
Коефіцієнт варіації результатів визначень – не більш 5%.

Матеріал для дослідження

Плазма крові. В якості антикоагулянтів використовувати інгібітори гліколізу, наприклад фторид/оксалат або фторид/гепарин. Без слідів гемолізу. Досліджувані зразки повинні бути ретельно відокремлені від формених елементів крові не пізніше, ніж через 15 min (хв) після взяття крові, так як клітини крові будуть перетворювати глюкозу в молочну кислоту. Після відокремлення, лактат буде стабільним.

Уникайте використання мутних та ліпідних зразків. Стабільність 8 h (год) 20-25 ºС або 14 d (доб) 2-8 ºС.

Перелік необхідного устаткування

Спектрофотометричне або колориметричне обладнання з довжиною хвилі 505 nm (нм).
Відповідні кювети з товщиною оптичного шару 1 cm (см).
Загальне лабораторне обладнання.

Підготовка реагентів

Перед використанням набір витримати при кімнатній температурі протягом 30 min (хв).

Приготування робочий реагенту РР розчиніть вміст одного флакона Р2 в 10 ml (мл) Р1. Закрити кришкою, перемішати РР стабільний 3 wk (тижд) при 2-8 °С.

Умови вимірювання:

довжина хвилі 505 (490-550) nm (нм)
кювета з товщиною оптичного шару 1 cm (см)
температура 37/15-25 ºC

Референтні величини

Грунтуючись на результатах досліджень, проведених лабораторіями, рекомендуємо користуватися нормами, приведеними нижче. Разом з тим, відповідно до правил GLP (Гарної лабораторної практики), кожна лабораторія повинна сама визначити для себе параметри норми, характерні для обстежуваної популяції.

Нормальний рівень лактату в плазмі крові становить: 0.5-2.2 mmol/l (ммоль/л) або 45-198 mg/l (мг/л).

Перехід в додаткові одиниці: mg/l (мг/л) х 0.01123 = mmol/l (ммоль/л)

Комплектація

1	2	3	4
	2.021	2.044	2.022
Вміст	50 визн.	100 визн.	200 визн.
Р1	1 х 50 ml (мл)	1 х 100 ml (мл)	1 х 200 ml (мл)
Р2	1 х 5 фл.	1 х 10 фл.	1 х 20 фл.
Стандарт	1 х 1 ml (мл)	1 х 1.5 ml (мл)	1 х 2 ml (мл)