Принцип методу
Прямий колориметричний тест без депротеїнізації зразка. У кислому буфері, при рН 4.7 мідь вивільняється з білка-переносника церулоплазміну та утворює специфічний забарвлений комплекс з 3,5-DiBr-PAESA [4-(3,5-дібром-2-піріділазо)-N-етил-(3-сульфопропіл)-N-анілін]. Оптична щільність новоутвореного стабільного комплексу пропорційна вмісту міді, присутньої в зразку.
Клінічне значення
Двовалентна мідь утворює комплекси з білками. Головна функція цих комплексів - регуляція окислювально-відновних процесів. Найбільш відомі білки, які містять мідь, мають здатність зв'язувати і взаємодіяти безпосередньо з молекулярним киснем. У плазмі приблизно 95% міді пов'язане з α-2-глобуліном - церулоплазміном (оксидаза з фероксидазною активністю). Різноманітність умов дефіциту міді в людському організмі визнано. Дефіцит міді спостерігається при остеопорозі та інших кістково-суглобових захворюваннях, і, можливо, патології серцево-судинної і нервової системи. Дефіцит міді призводить до зниження антиоксидантного захисту організму. Підвищений рівень міді може бути токсичним.
Клінічний діагноз не повинен базуватися на одному показникові, необхідно враховувати клінічні та інші лабораторні дані.
Склад набору
- Реагент 1. Буфер: Ацетатний буфер рН 4.7 ≥ 1 mmol/l (ммоль/л).
- Реагент 2. Комплексон: 3,5-DiBr-PAESA – 0.4 mmol/l (ммоль/л).
- Реагент 3. Відновлювач: аскорбінова кислота.
- Стандарт. Розчин міді. Точна концентрація вказана в сертифікаті якості.
- Ложка.
- Інструкція з використання.
- Сертифікат якості.
Аналітичні характеристики
- Лінійність вимірювального діапазону: 0.5 – 80 µmol/l (мкмоль/л). Відхилення від лінійності не перевищує 3%. Якщо отримані результати були більше, ніж межі лінійності, розведіть зразки 1:1 (в два рази) NaCl 9 g/l (г/л) та помножте результат на два.
- Чутливість не менш 0.5 µmol/l (мкмоль/л).
- Коефіцієнт варіації результатів визначень – не більш 3%.
Матеріал для дослідження
Сироватка або плазма крові. Досліджувані сироватки або плазми повинні бути ретельно відокремлені від формених елементів крові не пізніше, ніж через 1 h (год) після взяття крові. В якості антикоагулянта слід використовувати тільки гепарин. Уникайте використання мутних, ліпідних та гемолітичних зразків.
Стабільність зразка: 24 h (год) при 2-8 ºC, або 15 d (доб) при -20 ºC.
Перелік необхідного устаткування
- Спектрофотометричне або колориметричне обладнання з довжиною хвилі 582 nm (нм).
- Відповідні кювети з товщиною оптичного шару 1 cm (см).
- Загальне лабораторне обладнання.
Підготовка реагентів
Перед використанням набір витримати при кімнатній температурі протягом 30 min (хв).
Робочий реагент РР: додати одну дозу (ложкою) Р3 в один флакон Р1, акуратно.
РР стабільний протягом 15 d (доб) при 2-8 ºC, зберігати щільно закритим. Не використовуйте, якщо з’являється каламутність.
Р2 Готовий до використання.
Умови вимірювання:
- довжина хвилі 582 (570-590) nm (нм)
- кювета з товщиною оптичного шару 1 cm (см)
- температура 37 ºC
Референтні величини
Грунтуючись на результатах досліджень, проведених лабораторіями, рекомендуємо користуватися нормами, приведеними нижче. Разом з тим, відповідно до правил GLP (Гарної лабораторної практики), кожна лабораторія повинна сама визначити для себе параметри норми, характерні для обстежуваної популяції.
- Чоловіки 11.0 – 22.0 µmol/l (мкмоль/л) = 0.7 – 1.40 mg/l (мг/л)
- Жінки 12.6 – 24.4 µmol/l (мкмоль/л) = 0.8 – 1.55 mg/l (мг/л)
Перехід в додаткові одиниці: mg/l (мг/л) х 15.73 = µmol/l (мкмоль/л).
Комплектація
| 1 | 2 |
|---|---|
| 3.016 | |
| Вміст | 50 визн. |
| Р1 | 5 х 10 ml (мл) |
| Р2 | 1 х 3 ml (мл) |
| Р3 | 1 фл. |
| Стандарт | 1 х 10 ml (мл) |
| Ложка | 1 шт. |