Принцип метода
Прямой колориметрический тест без депротеинизации образца. В кислом буфере при рН 4.7 медь высвобождается из белка-переносчика церулоплазмина и образует специфический окрашенный комплекс с 3,5-DiBr-PAESA [4-(3,5-дибром-2-пиридилазо)-N-этил-(3-сульфопропил)-N-анилин. Оптическая плотность вновь образовавшегося стабильного комплекса пропорциональна содержанию меди, присутствующей в образце.
Клиническое значение
Двухвалентная медь образует комплексы с белками. Главная функция этих комплексов – регуляция окислительно-восстановительных процессов. Наиболее известные белки, содержащие медь, обладают способностью связывать и взаимодействовать непосредственно с молекулярным кислородом. В плазме примерно 95% меди связано с -2-глобулином - церулоплазмином (оксидаза с фероксидазной активностью). Разнообразие условий дефицита меди в человеческом организме признано. Дефицит меди наблюдается при остеопорозе и других костно-суставных заболеваниях и, возможно, патологии сердечно-сосудистой и нервной системы. Дефицит меди приводит к понижению антиоксидантной защиты организма. Повышенный уровень меди может быть токсичным.
Клинический диагноз не должен основываться на одном показателе, необходимо учитывать клинические и другие лабораторные данные.
Состав набора
- Реагент 1. Буфер: Ацетатный буфер рН 4.7 ≥ 1 ммоль/л (ммоль/л).
- Реагент 2. Комплексон: 3,5-DiBr-PAESA – 0.4 mmol/l (ммоль/л).
- Реагент 3. Восстановитель: аскорбиновая кислота.
- Стандарт. Раствор меди. Точная концентрация указана в сертификате качества.
- Кровати.
- Инструкция по использованию.
- Сертификат качества.
Аналитические характеристики
- Линейность измерительного диапазона: 0.5 – 80 µmol/l (мкмоль/л). Отклонение от линейности не превышает 3%. Если полученные результаты были больше пределов линейности, разведите образцы 1:1 (в два раза) NaCl 9 g/l (г/л) и умножьте результат на два.
- Чувствительность не менее 0.5 µmol/l (мкмоль/л).
- Коэффициент вариации результатов определений – не более 3%.
Материал для исследования
Сыворотка или плазма крови. Тестируемые сыворотки или плазмы должны быть тщательно отделены от форменных элементов крови не позднее, чем через 1 ч после взятия крови. В качестве антикоагулянта следует использовать только гепарин. Избегайте использования мутных, липидных и гемолитических образцов.
Стабильность образца: 24 ч (час) при 2-8 ºC, или 15 d (сут) при -20 ºC.
Перечень необходимого оборудования
- cпектрофотометрическое или колориметрическое оборудование с длиной волны 582 nm (нм).
- подходящие кюветы с толщиной оптического слоя 1 cm (см).
- общее лабораторное оборудование.
Подготовка реагентов
Перед использованием набор выдержать при комнатной температуре 30 мин (мин).
Рабочий реагент РР: добавить одну дозу (ложкой) Р3 в флакон Р1, аккуратно.
РР стабилен в течение 15 d (сут) при 2-8 ºC, хранить плотно закрытым. Не используйте, если появляется мутность.
Р2 Готов к использованию.
Условия измерения:
- длина волны 582 (570-590) nm (нм)
- кювета с толщиной оптического слоя 1 cm (см)
- температура 37 ºC
Референтные величины
Основываясь на результатах исследований, проведённых лабораториями, рекомендуем пользоваться нормами, приведенными ниже. Вместе с тем согласно правилам GLP (Хорошей лабораторной практики), каждая лаборатория должна сама определить для себя параметры нормы, характерные для обследуемой популяции.
- Мужчины 11.0 – 22.0 µmol/l (мкмоль/л) = 0.7 – 1.40 mg/l (мг/л)
- женщины 12.6 – 24.4 µmol/l (мкмоль/л) = 0.8 – 1.55 mg/l (мг/л)
Переход в дополнительные единицы: mg/l (мг/л) x 15.73 = µmol/l (мкмоль/л).
Комплектация
| 1 | 2 |
|---|---|
| 3.016 | |
| Содержимое | 50 определ. |
| Р1 | 5 х 10 мл (мл) |
| Р2 | 1 х 3 мл (мл) |
| Р3 | 1 фл. |
| Стандарт | 1 х 10 мл (мл) |
| Кровати | 1 шт. |