При інкубації зразка тригліцеридів з ліпопротеїнліпазою (ЛПЛ) відбувається реакція з утворенням вільного гліцерину та вільних жирних кислот. Гліцерин та АТФ, в присутності гліцеролкінази перетворюються в гліцерин-3-фосфат (Г3Ф) і аденозин-5-дифосфат (АДФ). Гліцерин-3-фосфат (Г3Ф) потім окислюється в присутності гліцеринфосфатдегідрогенази (ГФД, GPO) в дегідроксиацетонфосфат (ДАФ) і пероксид водню (H2O2). В останній реакції, перекис водню (H2O2) реагує з 4-амінофеназоном (4-АФ) і р-хлорфенолом в присутності пероксидази (ПOД, POD) з утворенням забарвленого продукту (червоного кольору):

Тригліцериди + H2O ЛПЛ→ гліцерин + жирні кислоти

Гліцерин + АТФ гліцеролкіназа→ Г3Ф + АДФ

Г3Ф + O2 ГФД→ ДАФ + H2O2

H2O2 + 4-АФ + р-хлорофенол ПОД→ хінонімін + H2O

Інтенсивність забарвлення прямо пропорційна концентрації тригліцеридів в пробі.

Клінічне значення

Тригліцериди - жири, які забезпечують енергією клітини. Вони транспортуються з клітин епітелію ліпопротеїдами в кров. При дієті з великою кількістю насичених жирів і вуглеводів буде спостерігатися підвищення рівня тригліцеридів. Збільшення в сироватці крові тригліцеридів відносне. Наприклад, при дисфункції печінки, в результаті гепатитів, при закупорці жовчних протоків або цирозі печінки, при діабеті.

Клінічний діагноз не повинен базуватися тільки на одному показникові, необхідно враховувати клінічні та інші лабораторні дані.

Склад набору

Реагент 1. Буфер:GOOD рН 6.3 -50 mmol/l (ммоль/л); р-хлорофенол -2 mmol/l (ммоль/л); ЛПЛ -150000 U/l (Од/л); гліцеролкіназа - 500 U/l (Од/л); гліцерол-3-оксидаза - 3500 U/l (Од/л); 4-АФ - 0.1 mmol/l (ммоль/л); АТФ - 0.1 mmol/l (ммоль/л).
Стандарт. Розчин тригліцеридів. Точна концентрація вказана в сертифікаті якості.
Інструкція з використання.
Сертифікат якості.

Аналітичні характеристики

Лінійність вимірювального діапазону: 0.11 - 11 mmol/l (ммоль/л). Відхилення від лінійності не перевищує 5%. Якщо отримані результати були більше, ніж межі лінійності, розведіть зразки 1:1 (в два рази) NaCl 9 g/l (г/л) та помножте результат на два.
Чутливість не менш 0.11 mmol/l (ммоль/л).
Коефіцієнт варіації результатів визначень – не більш 5%.

Матеріал для дослідження

Сироватка або плазма крові. Досліджувані сироватки або плазми повинні бути ретельно відокремлені від формених елементів крові не пізніше, ніж через 1 h (год) після взяття крові. Уникайте використання мутних, ліпідних та гемолітичних зразків.

Тригліцериди стабільні 5 d (доб) при 2-8 ºС.

Перелік необхідного устаткування

Спектрофотометричне або колориметричне обладнання з довжиною хвилі 505 nm (нм).
Відповідні кювети з товщиною оптичного шару 1 cm (см).
Загальне лабораторне обладнання.

Прим: Адаптації до напівавтоматичних і автоматичних приладів надаються за запитом.

Підготовка реагентів

Перед використанням набір витримати при кімнатній температурі протягом 30 min (хв).

Всі реагенти готові до використання.

Умови вимірювання:

довжина хвилі 505 (490-550) nm (нм)
кювета з товщиною оптичного шару 1 cm (см)
температура 37 ºC / 15-25 ºC

Референтні величини

Ґрунтуючись на результатах досліджень, проведених лабораторіями, рекомендуємо користуватися нормами, приведеними нижче. Разом з тим, відповідно до правил GLP (Гарної лабораторної практики), кожна лабораторія повинна сама визначити для себе параметри норми, характерні для обстежуваної популяції.

Нормальний рівень тригліцеридів в сироватці або плазмі крові становить:

чоловіки 0.45 – 1.8 mmol/l (ммоль/л)
жінки 0.4 – 1.5 mmol/l (ммоль/л)

Перехід в додаткові одиниці mg/l (мг/л) х 0.00113 = mmol/l (ммоль/л)

Комплектація

1	2	3	4
	4.001	4.002	4.003
Вміст	50 визн.	100 визн.	500 визн.
Р1	1 х 50 ml (мл)	1 х 100 ml (мл)	1 х 500 ml
Стандарт	1 х 1 ml (мл)	1 х 2 ml (мл)	1 х 5 ml (мл)