Принцип методу
При змішуванні зразків, що містять церулоплазмін, з антитілами до церулоплазміну утворюються нерозчинні комплекси. Ці комплекси викликають зміну поглинання залежно від концентрації церулоплазміну у зразку пацієнта, яку можна кількісно визначити.
Клінічне значення
Церулоплазмін - це α2-глобулін, який містить приблизно 95% загальної кількості міді в сироватці.
Кожна молекула церулоплазміну містить від шести до восьми атомів міді. Високий вміст іонів міді надає церулоплазміну синє забарвлення. Церулоплазмін може також зв'язувати і, можливо, транспортувати інші катіони, такі як магній. Церулоплазмін синтезується переважно клітинами печінки і в невеликих кількостях макрофагами і імфоцитами.Церулоплазмін найчастіше кількісно визначають як скринінговий тест на хворобу Вільсона.Однак важливо усвідомлювати, що кілька інших факторів, ключаючи дієту, гормони та інші генетичні порушення можуть впливати на рівень церулоплазміну у плазмі.
Синтез церулуплазміну помірно збільшується у відповідь на гострі інфекції, досягає піку через 4-20 днів після захворювання. Синтез також стимулюється естрогенами, а також під час вагітності. Низький рівень церулоплазміну в плазмі пояснюється відсутністю включення Cu2+ в молекули під час синтезу. Причинами є недостатність харчування (в т.ч порушення всмоктування), нездатність вивільняти Cu2+ з епітелію шлунково-кишкового тракту в кровообіг або нездатність молекули церулоплазміна приєднувати Cu2+. Рівні також можуть бути низькими при втраті крові або втраті протеїну в шлунковокишковому тракті чи ниркових синдромах.
Клінічний діагноз не повинен базуватися на одному показникові, необхідно враховувати клінічні та інші лабораторні дані.
Склад набору
- Реагент 1. Розчиник: тріс буфер - 20 mmol/l (ммоль/л), ПЕГ 8000 рН 8.3, натрію азид 0.95 g/l (г/л).
- Реагент 2. Антитіла: антитіла до церулоплазміну, овечя сироватка, рН 7.5, натрію азид 0.95 g/l (г/л).
- Інструкція з використання.
- Сертифікат якості.
Додаткові реагенти
СпЛ Калібратор Сироваткових білків постачається окремо.
Аналітичні характеристики
- Лінійність вимірювального діапазону: 11.2 - 910 mg/l (мг/л). Відхилення від лінійності не перевищує 5%. Якщо отримані результати були більше, ніж межі лінійності, розведіть зразки NaCl 9 g/l (г/л) 1:4 (в п'ять разів) та помножте результат на 5.
- Чутливість не менш 11.2 mg/l (мг/л).
- Коефіцієнт варіації результатів визначень – не більш 5%.
Матеріал для дослідження
Сироватка та плазма крові з ЕДТА або гепарином. Досліджувані сироватки або плазми повинні бути ретельно відокремлені від формених елементів крові протягом години. Якщо негайне центрифугування неможливо, зібрані зразки крові повинні зберігатися у льоді та центрифугуватися протягом години.
Уникайте використання мутних, ліпідних та гемолітичних зразків. Стабільний протягом 7 днів при температурі 2-8 °С або протягом 3 місяців при -20 °С.
Перелік необхідного устаткування
- Спектрофотометричне або колориметричне обладнання з довжиною хвилі 340 (320-360) nm (нм).
- Баня з термостатом і температурою 37ºС
- Відповідні кювети з товщиною оптичного шару 1 cm (см).
- Загальне лабораторне обладнання.
Підготовка реагентів
Перед використанням набір витримати при кімнатній температурі протягом 30 хвилин.
Всі реагенти готові до використання.
Умови вимірювання:
- довжина хвилі 340 nm (нм)
- кювета з товщиною оптичного шару 1 cm (см)
- температура 37ºC
Референтні величини
Грунтуючись на результатах досліджень, проведених лабораторіями, рекомендуємо користуватися нормами, приведеними нижче. Разом з тим, відповідно до правил GLP (Гарної лабораторної практики), кожна лабораторія повинна сама визначити для себе параметри норми, характерні для обстежуваної популяції.
Нормальний рівень гаптоглобіну становить 150-600 mg/l (мг/л).
Комплектація
| 1 | 2 |
|---|---|
| 0.000 | |
| Вміст | 50 визн. |
| Р1 | 1 х 40 ml (мл) |
| Р2 | 1 х 10 ml (мл) |