Принцип методу
При змішуванні зразків, що містять гаптоглобін, з антитілами до гаптоглобіну утворюються нерозчинні комплекси. Ці комплекси викликають зміну поглинання залежно від концентрації гаптоглобіну у зразку пацієнта, яку можна кількісно визначити.
Клінічне значення
Гаптоглобін - це α2-глікопротеїн, який синтезується в печінці і зв'язує безповоротно гемоглобін.
Комплекси гапто-гемоглобіну та вільний гаптоглобін відіграє важливу роль у накопиченні заліза та запобігає можливому пошкодженню нирок у наслідку виведення гемоглобіну. Як білок гострої фази гаптоглобін збільшується при наявності гострого запального процесу, некрозу тканин або злоякісних утворюваннях. Дефіцит гаптоглобіну в плазмі є наслідком наявності гемолізу «in vivo», наявністью естрогенів під час вагітності та прийомі оральних контрацептивів, а також при більшості форм гострих або хронічних гепатоцелюлярних захворюваннях, включаючи вірусний гепатит. Тест на гепатоглобін призначений для визначення та моніторингу гемолітичних порушень. За нормальних умов приблизно 1% циркулюючих еритроцитів руйнуються щодня. Якщоцей показник збільшується до 2%, це буде повністю виснаження гаптоглобіну плазми за відсутності стимуляції синтезу, наприклад гострого запалення або лікування кортикостероїдами.
Клінічний діагноз не повинен базуватися на одному показникові, необхідно враховувати клінічні та інші лабораторні дані.
Склад набору
- Реагент 1. Розчиник: тріс буфер - 20 mmol/l (ммоль/л), ПЕГ 8000 рН 8.3, натрію азид 0.95 g/l (г/л).
- Реагент 2. Антитіла: антитіла до гаптоглобіну, овечя сироватка, рН 7.5, натрію азид 0.95 g/l (г/л).
- Інструкція з використання.
- Сертифікат якості.
Додатковi реагенти
СпЛ Калібратор Сироваткових білків постачається окремо.
Аналітичні характеристики
- Лінійність вимірювального діапазону: 0.05-3 g/l (г/л). Відхилення від лінійності не перевищує 5%. Якщо отримані результати були більше, ніж межі лінійності, розведіть зразки NaCl 9 g/l (г/л) 1:4 (в п'ять разів) та помножте результат на 5. Ефекту прозони не було виявлено при 12 g/l (г/л).
- Чутливість не менш 0.05-3 g/l (г/л).
- Коефіцієнт варіації результатів визначень – не більш 5%.
Матеріал для дослідження
Сироватка або плазма крові з ЕДТА або гепарином. Досліджувані сироватки або плазми повинні бути ретельно відокремлені від формених елементів крові протягом години. Якщо негайне центрифугування неможливо, зібрані зразки крові повинні зберігатися у льоді та центрифугуватися протягом години.
Уникайте використання мутних, ліпідних та гемолітичних зразків.
Стабільний протягом 7 днів при температурі 2-8°С або протягом 3 місяців при -20°С.
Перелік необхідного устаткування
- Спектрофотометричне або колориметричне обладнання з довжиною хвилі 340 nm (нм).
- Баня з термостатом і температурою 37ºС
- Відповідні кювети з товщиною оптичного шару 1 cm (см).
- Загальне лабораторне обладнання.
Підготовка реагентів
Перед використанням набір витримати при кімнатній температурі протягом 30 хвилин.
Всі реагенти готові до використання.
Умови вимірювання:
- довжина хвилі 340 (320-360) nm (нм)
- кювета з товщиною оптичного шару 1 cm (см)
- температура 37ºC
Референтні величини
Грунтуючись на результатах досліджень, проведених лабораторіями, рекомендуємо користуватися нормами, приведеними нижче. Разом з тим, відповідно до правил GLP (Гарної лабораторної практики), кожна лабораторія повинна сама визначити для себе параметри норми, характерні для обстежуваної популяції.
Нормальний рівень гаптоглобіну становить 0.3-2 g/l (г/л).
Комплектація
| 1 | 2 |
|---|---|
| 0.000 | |
| Вміст | 50 визн. |
| Р1 | 1 х 40 ml (мл) |
| Р2 | 1 х 10 ml (мл) |