Принцип метода
При смешивании образцов, содержащих гаптоглобин, с антителами к гаптоглобину образуются нерастворимые комплексы. Эти комплексы вызывают изменение поглощения в зависимости от концентрации гаптоглобина в образце пациента, которую можно количественно определить.
Клиническое значение
Гаптоглобин – это α2-гликопротеин, который синтезируется в печени и связывает безвозвратно гемоглобин.
Комплексы гапто-гемоглобина и свободный гаптоглобин играют важную роль в накоплении железа и предотвращают возможное повреждение почек в результате выведения гемоглобина. В качестве белока острой фазы гаптоглобин увеличивается при наличии острого воспалительного процесса, некроза тканей или злокачественных образованиях. Дефицит гаптоглобина в плазме является следствием наличия гемолиза in vivo, наличием эстрогенов во время беременности и приеме оральных контрацептивов, а также при большинстве форм острых или хронических гепатоцеллюлярных заболеваниях, включая вирусный гепатит. Тест гепатоглобина предназначен для определения и мониторинга гемолитических нарушений. В нормальных условиях примерно 1% циркулирующих эритроцитов разрушаются ежедневно. Если этот показатель увеличивается до 2%, это будет полностью истощение гаптоглобина плазмы при отсутствии стимуляции синтеза, например острого воспаления или лечения кортикостероидами.
Клинический диагноз не должен основываться на одном показателе, необходимо учитывать клинические и другие лабораторные данные.
Состав набора
- Реагент 1. Растворитель: трис буфер - 20 ммоль/л (ммоль/л), ПЭГ 8000 рН 8.3, натрия азид 0.95 г/л (г/л).
- Реагент 2. Антитела: антитела к гаптоглобину, овечья сыворотка, рН 7.5, азид натрия 0.95 g/l (г/л).
- Инструкция по использованию.
- Сертификат качества.
Дополнительные реагенты
СпЛ Калибратор Сывороточных белков поставляется отдельно.
Аналитические характеристики
- Линейность измерительного диапазона: 0.05-3 г/л (г/л). Отклонение от линейности не превышает 5%. Если полученные результаты были больше, чем пределы линейности, разведите образцы NaCl 9 g/l (г/л) 1:4 (в пять раз) и умножьте результат на 5. Эффект прозоны не был обнаружен при 12 g/l (г/л).
- Чувствительность не менее 0.05-3 г/л (г/л).
- Коэффициент вариации результатов определений – не более 5%.
Материал для исследования
Сыворотка или плазма крови с ЭДТА или гепарином. Тестируемые сыворотки или плазмы должны быть тщательно отделены от форменных элементов крови в течение часа. Если немедленное центрифугирование невозможно, собранные образцы крови должны храниться во льду и центрифугироваться в течение часа.
Избегайте использования мутных, липидных и гемолитических образцов.
Стабилен в течение 7 дней при температуре 2-8°С или в течение 3 месяцев при -20°С.
Перечень необходимого оборудования
- cпектрофотометрическое или колориметрическое оборудование с длиной волны 340 nm (нм).
- Баня с термостатом и температурой 37ºС
- подходящие кюветы с толщиной оптического слоя 1 cm (см).
- общее лабораторное оборудование.
Подготовка реагентов
Перед использованием выдержать набор при комнатной температуре в течение 30 минут.
Все реагенты готовы к использованию.
Условия измерения:
- длина волны 340 (320-360) nm (нм)
- кювета с толщиной оптического слоя 1 cm (см)
- температура 37ºC
Референтные величины
Основываясь на результатах исследований, проведённых лабораториями, рекомендуем пользоваться нормами, приведенными ниже. Вместе с тем согласно правилам GLP (Хорошей лабораторной практики), каждая лаборатория должна сама определить для себя параметры нормы, характерные для обследуемой популяции.
Обычный уровень гаптоглобина составляет 0.3-2 g/l (г/л).
Комплектация
| 1 | 2 |
|---|---|
| 0.000 | |
| Содержимое | 50 определ. |
| Р1 | 1 х 40 мл (мл) |
| Р2 | 1 х 10 мл (мл) |