Холінестераза гідролізує бутирілціохолін до бутирата і тіохоліна. Тіохолін реагує з 5.5-дітіобіс-2-нітробензойною кислотою (DTNB) до форми 5-меркапто-2-нітробензойної кислоти (5-MNBA) за такими реакціями:

бутирілтіохолін + H2O → бутират + тіохолін

тіохолін + DTNB → 5-MNBA

Швидкість утворення 5-MNBA вимірюється фотометрично та пропорційна активності ферменту холінестерази в зразку.

Клінічне значення

Холінестераза це фермент, який присутній в плазмі та синтезується печінкою. Його справжні фізіологічні функції невідомі, можливо, що його функція - гідролізувати холін в плазмі. Активність холінестерази, як правило, залежить від функції печінки, є найчутливішим тестом впливу фосфорорганічних пестицидів і виявлення хворих з атиповими формами ферментів, які представляють високу чутливість до сукцініл-холіну.

Клінічний діагноз не повинен базуватися на одному показникові, необхідно враховувати клінічні та інші лабораторні дані.

Склад набору

Реагент 1. Буфер: Фосфатний буфер - 50 mmol/l (ммоль/л).
Реагент 2. Субстрат: 5,5'-дитіобіс-2-нітробензойна кислота - 0.25 mmol/l (ммоль/л); бутирилтіохолін - 7 mmol/l (ммоль/л).
Інструкція з використання.
Сертифікат якості.

Аналітичні характеристики

Лінійність вимірювального діапазону: 50 - 10000 U/l (Од/л). Відхилення від лінійності не перевищує 5%. Якщо отримані результати були більш, ніж межі лінійності, розведіть зразки 1:4 (в 5 разів) NaCl 9 g/l (г/л) та помножте результат на 5.
Чутливість не менш 50 U/l (Од/л).
Коефіцієнт варіації результатів визначень – не більш 5%.

Матеріал для дослідження

Сироватка або гепаринізована плазма крові. Досліджувані сироватки або плазми повинні бути ретельно відокрелені від формених елементів крові не пізніше, ніж через 1 h (год) після взяття крові. Уникайте використання мутних, ліпідних та гемолітичних зразків.

Стабільність зразків 7 d (доб) при 2-8 ºС.

Перелік необхідного устаткування

Спектрофотометричне або колориметричне обладнання з довжиною хвилі 405 nm (нм).
Відповідні кювети з товщиною оптичного шару 1 cm (см).
Загальне лабораторне обладнання.

Прим: Адаптації до напівавтоматичних і автоматичних приладів надаються за запитом

Підготовка реагентів

Перед використанням набір витримати при кімнатній температурі протягом 30 min (хв).

Приготування робочого реагенту РР: розчинити 5 таблеток Р2 у флаконі Р1 15 ml (мл). Закрити кришкою, перемішати.

РР стабільний 2 h (год) при 2-8 ºC.

Умови вимірювання:

довжина хвилі 405 nm (нм)
кювета з товщиною оптичного шару 1 cm (см)
температура. 25 ºС /30 ºС /37 ºC

Референтні величини

Ґрунтуючись на результатах досліджень, проведених лабораторіями, рекомендуємо користуватися нормами, приведеними нижче. Разом з тим, відповідно до правил GLP (Гарної лабораторної практики), кожна лабораторія повинна сама визначити для себе параметри норми, характерні для обстежуваної популяції.