Принцип методу
Лактатдегідрогеназа (ЛДГ) каталізує відновлення пірувата з НАДФ, відповідно до наступної реакції:
Піруват + NADH + H + → L-Лактат + NAD +
Рівень зниження концентрації НАДФ пропорційний каталітичний активності ЛДГ, що міститься у зразку.
Клінічне значення
ЛДГ - фермент з широким розподілом в тканинах організму. Найвища концентрація ЛДГ в печінці, серці, нирках, скелетних м'язах і еритроцитах.
Підвищений рівень ферменту відзначається в сироватці крові при інфаркті міокарда, хворобах печінки, лейкозах, захворюваннях нирок, м'язовій дистрофії і анемії, пухлинах, панкреатиті. Клінічний діагноз не повинен базуватися тільки на одному показникові, необхідно враховувати клінічні та інші лабораторні дані.
Склад набору
- Реагент 1. Буфер: імідазол - 65 mmol/l (ммоль/л); піруват - 0.6 mmol/l (ммоль/л).
- Реагент 2. Субстрат: NADH - 0.18 mmol/l (ммоль/л).
- Інструкція з використання.
- Сертифікат якості.
Аналітичні характеристики
- Лінійність вимірювального діапазону: 30 - 1300 U/l (Од/л). Відхилення від лінійності не перевищує 5 %. Якщо отримані результати були більше, ніж межі лінійності, розведіть зразки 1:9 (в десять разів) NaCl 9 g/l (г/л) та помножте результат на 10.
- Чутливість не менш 30 U/l (Од/л).
- Коефіцієнт варіації результатів визначень – не більш 5%.
Матеріал для дослідження
Сироватка крові. Досліджувані сироватки повинні бути ретельно відокремлені від формених елементів крові не пізніше, ніж через 1 h (год) після взяття крові. Уникайте використання мутних, ліпідних та гемолітичних зразків.
Зразки стабільні 2 d (доб) при 2-8 ºC.
Перелік необхідного устаткування
- Спектрофотометричне або колориметричне обладнання з довжиною хвилі 340 nm (нм).
- Відповідні кювети з товщиною оптичного шару 1 cm (см).
- Загальне лабораторне обладнання. Прим: Адаптації до напівавтоматичних і автоматичних приладів надаються за запитом
Підготовка реагентів
Перед використанням набір витримати при кімнатній температурі протягом 30 min (хв).
Приготування робочого реагенту РР: змішати 4 об'єми Р1 (буфер) і 1 об'єм Р2 (субстрат).
РР стабільний 15 d (доб) при 2-8 ºC або 5 d (доб) при кімнатній температурі 15-25 ºC.
Умови вимірювання:
- довжина хвилі 340 nm (нм)
- кювета з товщиною оптичного шару 1 cm (см)
- температура 25 ºC / 30 ºC / 37 ºC
Референтні величини
Ґрунтуючись на результатах досліджень, проведених лабораторіями, рекомендуємо користуватися нормами, приведеними нижче. Разом з тим, відповідно до правил GLP (Гарної лабораторної практики), кожна лабораторія повинна сама визначити для себе параметри норми, характерні для бстежуваної популяції.
| 1 | 2 | 3 |
|---|---|---|
| 25 ºC | 30 ºC | 37 ºC |
| 120-240 U/l (Од/л) | 160-320 U/l (Од/л) | 230-460 U/l (Од/л) |
Комплектація
| 1 | 2 | 3 |
|---|---|---|
| 1.026 | 1.027 | |
| Вміст | 30 визн. | 100 визн. |
| Р1 | 1 х 72 ml (мл) | 1 х 240 ml (мл) |
| Р2 | 1 х 18 ml (мл) | 1 х 60 ml (мл) |