Принцип метода
Лактатдегидрогеназа (ЛДГ) катализирует восстановление пирувата с НАДФ, согласно следующей реакции:
Пироват + NADH + H + → L-Лактат + NAD +
Уровень снижения концентрации НАДФ пропорционален каталитической активности ЛДГ, содержащейся в образце.
Клиническое значение
ЛДГ – фермент с широким распределением в тканях организма. Высокая концентрация ЛДГ в печени, сердце, почках, скелетных мышцах и эритроцитах.
Повышенный уровень фермента отмечается в сыворотке крови при инфаркте миокарда, болезнях печени, лейкозах, заболеваниях почек, мышечной дистрофии и анемии, опухолях, панкреатите. Клинический диагноз не должен основываться только на одном показателе, необходимо учитывать клинические и другие лабораторные данные.
Состав набора
- Реагент 1. Буфер: имидазол – 65 mmol/l (ммоль/л); пируват – 0.6 mmol/l (ммоль/л).
- Реагент 2. Субстрат: NADH – 0.18 mmol/l (ммоль/л).
- Инструкция по использованию.
- Сертификат качества.
Аналитические характеристики
- Линейность измерительного диапазона: 30 – 1300 U/l (Од/л). Отклонение от линейности не превышает 5%. Если полученные результаты были больше пределов линейности, разведите образцы 1:9 (в десять раз) NaCl 9 g/l (г/л) и умножьте результат на 10.
- Чувствительность не менее 30 U/l (Од/л).
- Коэффициент вариации результатов определений – не более 5%.
Материал для исследования
Сыворотка крови. Тестируемые сыворотки должны быть тщательно отделены от форменных элементов крови не позднее, чем через 1 ч после взятия крови. Избегайте использования мутных, липидных и гемолитических образцов.
Образцы стабильны 2 d (сутки) при 2-8 ºC.
Перечень необходимого оборудования
- cпектрофотометрическое или колориметрическое оборудование с длиной волны 340 nm (нм).
- подходящие кюветы с толщиной оптического слоя 1 cm (см).
- общее лабораторное оборудование. Прим: Адаптации к полуавтоматическим и автоматическим приборам предоставляются по запросу
Подготовка реагентов
Перед использованием набор выдержать при комнатной температуре 30 мин (мин).
Приготовление рабочего реагента РР: смешать 4 объема Р1 (буфер) и 1 объем Р2 (субстрат).
РР стабилен 15 d (сут) при 2-8 ºC или 5 d (сут) при комнатной температуре 15-25 ºC.
Условия измерения:
- длина волны 340 nm (нм) – кювета с толщиной оптического слоя 1 cm (см)
- температура 25 ºC / 30 ºC / 37 ºC
Референтные величины
Основываясь на результатах исследований, проведенных лабораториями, рекомендуем пользоваться нижеприведенными нормами. Вместе с тем, согласно правилам GLP (Хорошей лабораторной практики), каждая лаборатория должна сама определить для себя параметры нормы, характерные для слежки. популяции.
| 1 | 2 | 3 |
|---|---|---|
| 25 ºC | 30 ºC | 37 ºC |
| 120-240 U/l (Ед/л) | 160-320 U/l (Ед/л) | 230-460 U/l (Ед/л) |
Комплектация
| 1 | 2 | 3 |
|---|---|---|
| 1.026 | 1.027 | |
| Содержимое | 30 определ. | 100 определ. |
| Р1 | 1 х 72 мл (мл) | 1 х 240 мл (мл) |
| Р2 | 1 х 18 мл (мл) | 1 х 60 мл (мл) |