Панкреатична ліпаза в присутності коліпази, дезоксихолату та іонів кальцію, гідролізує субстрат ефір 1-2-O-ділаурил-рак-гліцеро-3-глутарової кислоти. Послідовність реакцій, що беруть участь в ферментативному визначення прямої ліпази полягає в наступному: ефір 1-2-O-ділаурил-рак-гліцеро-3-глутарової- кислоти → 1-2-O-ділаурилгліцерин + эфір глутарової кислоти (6-метилрезофурин) (нестабільний) → Глутарова кислота + метилрезофурин

Швидкість формування метилрезофурину пропорційна каталітичній активності ліпази, присутньої у зразку, і може бути виміряна фотометрично.

Клінічне значення

Ліпаза - фермент підшлункової залози необхідним для поглинання та перетравлювання поживних речовин, які каталізують гідроліз гліцеринових складних ефірів жирних кислот. Визначення ліпази використовується для діагностики захворювань підшлункової залози, таких як гострий і хронічний панкреатит, і обструкції підшлункових каналів.

Клінічний діагноз не повинен базуватися на одному показникові, необхідно враховувати клінічні та інші лабораторні дані.

Склад набору

Реагент 1. Буфер. TRIS - 40 mmol/l (ммоль/л), коліпаза >1 mg/l (мг/л), дезоксихолат - 1,8 mmol/l (ммоль/л), тауродезоксіхолат - 7,2 mmol/l (ммоль/л).
Реагент 2. Субстрат. Тартрат - 15 mmol/l (ммоль/л), ліпаза 0,7 mg/l (мг/л), хлорид кальцію - 0,1 mmol/l (ммоль/л).
Інструкція з використання.
Сертифікат якості.

Додаткові реагенти

Калібратор ліпази постачається окремо.

Аналітичні характеристики

Лінійність вимірювального діапазону: 5 - 250 U/l (Од/л).

Відхилення від лінійності не перевищує 5%. Якщо отримані результати були більше, ніж межі лінійності, розведіть зразки 1:9 (в десять разів) NaCl 9 g/l (г/л) та помножте результат на 10. 2. Чутливість не менш 5 U/l (Од/л). 3. Коефіцієнт варіації результатів визначень – не більш 5%.

Матеріал для дослідження

Сироватка або плазма крові. В якості антикоагулянтів використовувати цитрат натрію, ЕДТА або гепарин. Досліджувані сироватки або плазми повинні бути ретельно відокремлені від формених елементів крові не пізніше, ніж через 1 h (год) після взяття крові. Уникайте використання мутних, ліпідних та гемолітичних зразків та повторного заморожування-відтавання. Стабільність 2 d (доб) при 2-8 ºC.

Перелік необхідного устаткування

Спектрофотометричне або колориметричне обладнання з довжиною хвилі 580 nm (нм).
Відповідні кювети з товщиною оптичного шару 1 cm (см).
Загальне лабораторне обладнання.

Підготовка реагентів

Перед використанням набір витримати при кімнатній температурі протягом 30 min (хв).

Р1 і Р2 реагенти готові до використання. Стабільні після відкриття 90 d (доб) при 2-8 ºC.

Р2 обережно перемішати перед використанням.

Калібратор: додати 1 ml (мл) дистильованої води. Закрити та акуратно перемішати вміст. Стабільний 7 d (доб) при 2-8 °С або 3 mth (міс) при -20 °С.

Умови вимірювання:

довжина хвилі 580 nm (нм)
кювета з товщиною оптичного шару 1 cm (см)
постійна температура 37 ºC

Референтні величини

Грунтуючись на результатах досліджень, проведених лабораторіями, рекомендуємо користуватися нормами, приведеними нижче. Разом з тим, відповідно до правил GLP (Гарної лабораторної практики), кожна лабораторія повинна сама визначити для себе параметри норми, характерні для обстежуваної популяції.

Нормальний рівень ліпази в сироватці або плазмі крові становить < 38 U/l (Од/л).

Комплектація