Панкреатическая липаза в присутствии колипазы, дезоксихолата и ионов кальция гидролизует субстрат эфир 1-2-O-дилаурил-рак-глицеро-3-глутаровой кислоты. Последовательность реакций, участвующих в ферментативном определении прямой липазы заключается в следующем: эфир 1-2-O-дилаурил-рак-глицеро-3-глутаровой кислоты → 1-2-O-дилаурилглицерин + эфир глутаровой кислоты (6-метилрезофурин) (нестабильный) → Глутаровая кислота + метилрезофурин

Скорость формирования метилрезофурина пропорциональна каталитической активности липазы, присутствующей в образце, и может быть измерена фотометрически.

Клиническое значение

Липаза – фермент поджелудочной железы необходимым для поглощения и переваривания питательных веществ, катализирующих гидролиз сложных глицериновых эфиров жирных кислот. Определение липазы используется для диагностики заболеваний поджелудочной железы, таких как острый и хронический панкреатит и обструкции поджелудочных каналов.

Клинический диагноз не должен основываться на одном показателе, необходимо учитывать клинические и другие лабораторные данные.

Состав набора

Реагент 1. Буфер. TRIS - 40 mmol/l (ммоль/л), колипаза >1 mg/l (мг/л), дезоксихолат - 1,8 mmol/l (ммоль/л), тауродеоксихолат - 7,2 mmol/l (ммоль/л).
Реагент 2. Субстрат. Тартрат – 15 mmol/l (ммоль/л), липаза 0,7 mg/l (мг/л), хлорид кальция – 0,1 mmol/l (ммоль/л).
Инструкция по использованию.
Сертификат качества.

Дополнительные реагенты

Калибратор липазы поставляется отдельно.

Аналитические характеристики

Линейность измерительного диапазона: 5 – 250 U/l (Од/л).

Отклонение от линейности не превышает 5%. Если полученные результаты были больше пределов линейности, разведите образцы 1:9 (в десять раз) NaCl 9 g/l (г/л) и умножьте результат на 10. 2. Чувствительность не менее 5 U/l (Од/л). 3. Коэффициент вариации результатов определений – не более 5%.

Материал для исследования

Сыворотка или плазма крови. В качестве антикоагулянтов использовать цитрат натрия, ЭДТА или гепарин. Тестируемые сыворотки или плазмы должны быть тщательно отделены от форменных элементов крови не позднее, чем через 1 ч после взятия крови. Избегайте использования мутных, липидных и гемолитических образцов и повторной заморозки-оттаивания. Стабильность 2 d (сутки) при 2-8 ºC.

Перечень необходимого оборудования

cпектрофотометрическое или колориметрическое оборудование с длиной волны 580 nm (нм).
подходящие кюветы с толщиной оптического слоя 1 cm (см).
общее лабораторное оборудование.

Подготовка реагентов

Перед использованием набор выдержать при комнатной температуре 30 мин (мин).

Р1 и Р2 реагенты готовы к использованию. Стабильные после открытия 90 d (сутки) при 2-8 ºC.

Р2 осторожно перемешать перед использованием.

Калибратор: добавить 1 ml (мл) дистиллированной воды. Закрыть и аккуратно перемешать содержимое. Стабильный 7 d (сут) при 2-8 °С или 3 mth (мес) при -20 °С.

Условия измерения:

длина волны 580 nm (нм) – кювета с толщиной оптического слоя 1 cm (см)
постоянная температура 37 ºC

Референтные величины

Основываясь на результатах исследований, проведённых лабораториями, рекомендуем пользоваться нормами, приведенными ниже. Вместе с тем согласно правилам GLP (Хорошей лабораторной практики), каждая лаборатория должна сама определить для себя параметры нормы, характерные для обследуемой популяции.

Нормальный уровень липазы в сыворотке крови или плазме крови составляет < 38 U/l (Од/л).

Комплектация