Під дією ферменту аспартатамінотрансферази (АСТ) в результаті переамінування відбувається перенос аміногрупи з аспартату на α-кетоглутарат. Утворений в даній реакції оксалоацетат при участі ферменту малатдегідрогенази (МДГ) і коферменту НАДН2 перетворюється на малат.

L-аспартат + а-кетоглютарат АСТ --> глютамат + оксалацетат оксалацетат + NADH + H + МДГ --> малат + NAD +

Швидкість окислення НАДН2 в ході другої реакції визначається по зменшенню оптичної щільності реакційного середовища при 340 nm (нм) і пропорційна активності АСТ, що міститься у зразку і вимірюється на фотометрі.

Клінічне значення

АСТ - це клітинний фермент, який знаходиться у високій концентрації в серцевому м'язі, клітинах печінки, клітинах м'язів скелету і в менших обсягах в інших тканинах. Підвищений рівень АСТ в сироватці крові не є специфічним показником захворювання печінки. Використовується, головним чином, для діагностики та контролю перебігу хвороб печінки поряд з іншими ферментами, такими як AЛТ і лужна фосфатаза. Також визначення АСТ використовується для контролю стану пацієнтів після інфаркту міокарда, при хворобі скелетних м'язів та ін.

Клінічний діагноз не повинен базуватися тільки на одному показникові, необхідно враховувати клінічні та інші лабораторні дані.

Склад набору

Реагент 1. Буфер: трис рН 7.8 - 80 mmol/l (ммоль/л); ЛДГ - 800 U/l (Од/л); МДГ - 600 U/l (Од/л); L-аспартат - 200 mmol/l (ммоль/л).
Реагент 2. Субстрат: NADH – 0.18 mmol/l (ммоль/л); a-кетоглуторат - 15 mmol/l (ммоль/л).
Інструкція з використання.
Сертифікат якості.

Аналітичні характеристики

Лінійність вимірювального діапазону: 4 - 260 U/l (Од/л). Відхилення від лінійності не перевищує 7 %. Якщо отримані результати були більше, ніж межі лінійності, розведіть зразки 1:9 NaCl (в десять разів) 9 g/l (г/л) та помножте результат на 10.
Чутливість не менш 4 U/l (Од/л).
Коефіцієнт варіації результатів визначень – не більш 7%.

Матеріал для дослідження

Сироватка або плазма крові. Досліджувані сироватки або плазми повинні бути ретельно відокремлені від формених елементів крові не пізніше, чим через 1 h (год) після взяття крові. Уникайте використання мутних, ліпідних та гемолітичних зразків.

Перелік необхідного устаткування

Спектрофотометричне або колориметричне обладнання з довжиною хвилі 340 nm (нм).
Відповідні кювети з товщиною оптичного шару 1 cm (см).
Загальне лабораторне обладнання. Прим: Адаптації до напівавтоматичних і автоматичних приладів надаються за запитом.

Підготовка реагентів

Перед використанням набір витримати при кімнатній температурі протягом 30 min (хв). Приготування робочого реагенту РР: змішати 4 об’єми Р1 (буфер) та 1 об'єм Р2 (субстрат). РР стабільний 7 днів при 2-8 ºC або 24 h (год) при кімнатній температурі 15-25 ºC.

Умови вимірювання:

довжина хвилі 340 nm (нм)
кювета з товщиною оптичного шару 1 cm (см)
температура 25 ºC / 30 ºC / 37 ºC

Референтні величини

Ґрунтуючись на результатах досліджень, проведених лабораторіями, рекомендуємо користуватися нормами, приведеними нижче. Разом з тим, відповідно до правил GLP (Гарної лабораторної практики), кожна лабораторія повинна сама визначити для себе параметри норми, характерні для обстежуваної популяції.

1	2	3
	25 ºC	30 ºC
Чоловіки, U/l (Од/л) до	19	26
Жінки, U/l (Од/л) до	16	22

Комплектація

1	2	3	4	5
	1.037 1.013 1.014 1.015
Вміст	50 визн.	100 визн.	500 визн.	1000 визн.
Р1	1 х 40 ml (мл)	1 х 80 ml (мл)	1 х 400 ml (мл)	1 х 800 ml (мл)
Р2	1 х 10 ml (мл)	1 х 20 ml (мл)	1 х 100 ml (мл)	1 х 200 ml (мл)