Під дією ферменту аланін амінотрансферази (АЛТ) в результаті переамінування відбувається перенос аміногрупи з аланіну на α-кетоглутарат. Утворений в даній реакції піруват за участю ферменту лактатдегідрогенази (ЛДГ) і коферменту НАДН2 перетворюється в лактат.

L-aланін + α-кетоглутарат АЛТ --> глутамат + піруват

Піруват + NADH + H+ ЛДГ --> лактат + NAD+

Швидкість окислення НАДН2 в ході другої реакції визначається по зменшеннюоптичної щільності реакційного середовища при 340 nm (нм) і пропорційна активності АЛТ, що міститься у зразку і вимірюється на фотометрі.

Клінічне значення

АЛТ є клітинним ферментом, який знаходиться у високій концентрації в печінці та нирках. Висока концентрація спостерігається при гепатиті, при хворобах м'язів і травмах. Однак визначення активності АЛТ вважається більш специфічним для діагностики хвороб печінки.

Визначення АЛТ в поєднанні з визначенням AСТ використовують для діагностики інфаркту міокарда. Оскільки обсяг AЛТ залишається в межах норми в присутності підвищених рівнів AСT.

Клінічний діагноз не повинен базуватися тільки на одному показникові, необхідно враховувати клінічні та інші лабораторні дані.

Склад набору

Реагент 1. Буфер: трис рН 7.8 - 100 mmol/l (ммоль/л), ЛДГ - 1200 U/l (Од/л), L-аланін – 500 mmol/l (ммоль/л).
Реагент 2. Субстрат: NADH – 0.18 mmol/l (ммоль/л), α-кетоглуторат - 15 mmol/l (ммоль/л).
Інструкція з використання.
Сертифікат якості.

Аналітичні характеристики

Лінійність вимірювального діапазону: 4 - 260 U/l (Од/л). Відхилення від лінійності не перевищує 7 %. Якщо отримані результати були більше, ніж межі лінійності, розведіть зразки 1:9 (в десять разів) NaCl 9 g/l (г/л) та помножте результат на 10.
Чутливість не менш 4 U/l (Од/л).
Коефіцієнт варіації результатів визначень – не більш 7%.

Матеріал для дослідження

Сироватка або плазма крові. Стабільність зразків протягом 7 d (доб) при 2-8ºС. Досліджувані сироватки або плазми повинні бути ретельно відокремлені від формених елементів крові не пізніше, ніж через 1 h (год) після взяття крові. Уникайте використання мутних, ліпідних та гемолітичних зразків.

Перелік необхідного устаткування

Спектрофотометричне або колориметричне обладнання з довжиною хвилі 340 nm (нм).
Відповідні кювети з товщиною оптичного шару 1 cm (см).
Загальне лабораторне обладнання. Прим: Адаптації до напівавтоматичних і автоматичних приладів надаються за запитом.

Підготовка реагентів

Перед використанням набір витримати при кімнатній температурі протягом 30 min (хв). Приготування робочого реагенту РР: змішати 4 об'єми Р1 (буфер) та 1 об'єм Р2 (субстрат). РР стабільний 7 d (доб) при 2-8 ºC або 24 h (год) при кімнатній температурі 15-25 ºC.

Умови вимірювання:

довжина хвилі 340 nm (нм)
кювета з товщиною оптичною шару 1 cm (см)
температура 25 ºC / 30 ºC / 37 ºC

Референтні величини

Ґрунтуючись на результатах досліджень, проведених лабораторіями, рекомендуємо користуватися нормами, приведеними нижче. Разом з тим, відповідно до правил GLP (Гарної лабораторної практики), кожна лабораторія повинна сама визначити для себе параметри норми, характерні для бстежуваної популяції.

1	2	3	4
	25ºC	30ºC	37ºC
Чоловіки, U/l (Од/л) до	22	29	40
Жінки, U/l (Од/л) до	18	22	32

Норми для новонароджених вище вдвічі, ніж у дорослих. Це пояснюється властивістю гепатоцитів у новонароджених. Цей рівень знижується до рівня дорослого приблизно на 3-му місяці життя новонародженого.

Комплектація

1	2	3	4	5
	1.036	1.006	1.007	1.008
Вміст	50 визн.	100 визн.	500 визн.	1000 визн.
Р1	1 х 40 ml (мл)	1 х 80 ml (мл)	1 х 400 ml (мл)	1 х 800 ml (мл)
Р2	1 х 10 ml (мл)	1 х 20 ml (мл) 1 х 100 ml (мл) 1 х 200 ml (мл)