Аланинминотран сфераза-кон. СпЛ (АЛТ-кон.СпЛ) 50 мл/50 опред

Принцип метода

Под действием фермента аланин аминотрансферазы (АЛТ) в результате переаминирования происходит перенос аминогруппы из аланина на α-кетоглутарат. Образованный в данной реакции пируват с участием фермента лактатдегидрогеназы (ЛДГ) и кофермента НАДН2 превращается в лактат.

L-аланин + α-кетоглутарат АЛТ --> глутамат + пируват

Пироват + NADH + H+ ЛДГ --> лактат + NAD+

Скорость окисления НАДН2 в ходе второй реакции определяется по уменьшению оптической плотности реакционной среды при 340 nm (нм) и пропорциональна активности АЛТ, содержащейся в образце и измеряемом на фотометре.

Клиническое значение

АЛТ является клеточным ферментом, который находится в высокой концентрации в печени и почках. Высокая концентрация наблюдается при гепатите, болезнях мышц и травмах. Однако определение активности АЛТ считается более специфичным для диагностики болезней печени.

Определение АЛТ в сочетании с определением AСТ используют для диагностики инфаркта миокарда. Поскольку объем AЛТ остается в пределах нормы в присутствии повышенных уровней AСТ.

Клинический диагноз не должен основываться только на одном показателе, необходимо учитывать клинические и другие лабораторные данные.

Состав набора

1. Реагент 1. Буфер: трис рН 7.8 – 100 mmol/l (ммоль/л), ЛДГ – 1200 U/l (Од/л), L-аланин – 500 mmol/l (ммоль/л).
2. Реагент 2. Субстрат: NADH – 0.18 mmol/l (ммоль/л), α-кетоглуторат – 15 mmol/l (ммоль/л).
3. Инструкция по использованию.
4. Сертификат качества.

Аналитические характеристики

1. Линейность измерительного диапазона: 4 – 260 U/l (Од/л). Отклонение от линейности не превышает 7%. Если полученные результаты были больше пределов линейности, разведите образцы 1:9 (в десять раз) NaCl 9 g/l (г/л) и умножьте результат на 10.
2. Чувствительность не менее 4 U/l (Од/л).
3. Коэффициент вариации результатов определений – не более 7%.

Материал для исследования

Сыворотка или плазма крови. Стабильность образцов в течение 7 d (сут) при 2-8ºС. Тестируемые сыворотки или плазмы должны быть тщательно отделены от форменных элементов крови не позднее, чем через 1 ч после взятия крови. Избегайте использования мутных, липидных и гемолитических образцов.

Перечень необходимого оборудования

• cпектрофотометрическое или колориметрическое оборудование с длиной волны 340 nm (нм).
• подходящие кюветы с толщиной оптического слоя 1 cm (см).
• общее лабораторное оборудование. Прим: Адаптации к полуавтоматическим и автоматическим приборам предоставляются по запросу.

Подготовка реагентов

Перед использованием набор выдержать при комнатной температуре 30 мин (мин). Приготовление рабочего реагента РР: смешать 4 объема Р1 (буфер) и 1 объем Р2 (субстрат). РР стабилен 7 d (сут) при 2-8 ºC или 24 ч (ч) при комнатной температуре 15-25 ºC.

Условия измерения:

• длина волны 340 nm (нм)
• кювета с толщиной оптического слоя 1 cm (см)
• температура 25 ºC / 30 ºC / 37 ºC

Референтные величины

Основываясь на результатах исследований, проведенных лабораториями, рекомендуем пользоваться нижеприведенными нормами. Вместе с тем, в соответствии с правилами GLP (Хорошей лабораторной практики), каждая лаборатория должна сама определить для себя параметры нормы, характерные для наблюдаемой популяции.

Нормы для новорожденных выше вдвое, чем у взрослых. Это объясняется свойством гепатоцитов у новорожденных. Этот уровень снижается до уровня взрослого примерно на 3 месяце жизни новорожденного.

Комплектация