α-Амілаза розщеплює крохмаль по Літнер з утворенням продуктів, які не дають кольорової реакції з йодом. Зменшення інтенсивності забарвлення йод-крохмального комплексу в одиницю часу пропорційна активності ферменту.

Клінічне значення

α-Амілаза представляє собою фермент, який бере участь в розщепленні глікогену і крохмалю. α-Амілаза утворюється головним чином екзокринно підшлунковою залозою та слинними залозами. Визначення проводиться для діагностики та контролю захворювань підшлункової залози, як гострого так і хронічного панкреатиту. Активність α-амілази також може характеризувати жовчні або шлунковокишкові захворювання та інші порушення.

Клінічний діагноз не повинен базуватися тільки на одному показникові, необхідно враховувати клінічні та інші лабораторні дані.

Склад набору

Реагент 1. Буфер:Фосфатний буфер, 0.2 mol/l (моль/л).
Реагент 2. Субстрат:крохмаль по Лiтнер.
Реагент 3. Розчин йоду, 0.1H.
Інструкція з використання.
Сертифікат якості.

Аналітичні характеристики

Лінійність вимірювального діапазону: 3 – 36 mg/(sl) (мг/(секл)). Відхилення від лінійності не перевищує 10 %. Якщо отримані результати були більше, ніж межі лінійності, зразки розводять розчином NaCl 9 g/l (г/л).
Чутливість не менш 3 mg/(sl) (мг/(секл)).
Коефіцієнт варіації результатів визначень – не більш 10%.

Матеріал для дослідження

Сироватка або плазма крові (рекомендується використовувати гепарин, в якості антикоагулянта). Досліджувані сироватки або плазми повинні бути ретельно відокремлені від формених елементів крові не пізніше, ніж через 1 h (год) після взяття крові. Уникайте використання мутних, ліпідних та гемолітичних зразків.
Сечу для зберігання довести до рН 7.0.
Дуоденальний вміст. Якщо отримані результати були більше, ніж межі лінійності, зразки розводять розчином NaCl 9 g/l (г/л).

Рекомендовані розведення: сеча розводиться в 10 разів, дуоденальний вміст - в 100 разів. Отримані результати перемножують на коефіцієнт розведення.

Перелік необхідного устаткування

Спектрофотометричне або колориметричне обладнання з довжиною хвилі 640 (600 - 700) nm (нм).
Відповідні кювети з товщиною оптичного шару 1 cm (см).
Баня водяна з термостатом з температурою 37 ºС.
Загальне лабораторне обладнання.

Прим: Адаптації до напівавтоматичних і автоматичних приладів надаються за запитом

Підготовка реагентів

Перед використанням набір витримати при кімнатній температурі протягом 30 min (хв).

Приготування робочого реагенту РР: змішати Р2 з Р1 у співвідношенні 1 : 24. РР стабільний 14 d (доб) при температурі 2-8 ºC в непрозорому (темному) посуді.

Умови вимірювання:

довжина хвилі 640 nm (нм)
кювета з товщиною оптичного шару 1 cm (см)
температура 37 ºC

Референтні величини

Ґрунтуючись на результатах досліджень, проведених бораторіями, рекомендуємо користуватися нормами, приведеними нижче. Разом з тим, відповідно до правил GLP (Гарної лабораторної практики), кожна лабораторія повинна сама визначити для себе параметри норми, характерні для обстежуваної популяції.

Сироватка (плазма) 3.3-8.9 mg/(sl) (мг/(секл)) / 12-32 g/(hl) (г/(годл))
Сеча 5.5-44.4 mg/(sl) (мг/(секл)) / 20-160 g/(hl) (г/(годл))
Дуоденальний вміст 1.7-4.4 g/(sl) (г/(секл)) / 6-16 g/(hml) (г/(годмл))
Перехід в додаткові одиниці: 1 mg/(sl) (мг/(секл)) = 3.6 g/(hl) (г/(годл)) = 0.0036 g/(hml) (г/(годмл))