Принцип метода
α-Амилаза расщепляет крахмал по литнеру с образованием продуктов, не дающих цветовой реакции с йодом. Уменьшение интенсивности окраски йод-крахмального комплекса в единицу времени пропорционально активности фермента.
Клиническое значение
α-Амилаза представляет собой фермент, участвующий в расщеплении гликогена и крахмала. α-Амилаза образуется главным образом экзокринной поджелудочной железой и слюнными железами. Определение производится для диагностики и контроля заболеваний поджелудочной железы, как острого, так и хронического панкреатита Активность α-амилазы также может характеризовать желчные или желудочно-кишечные заболевания и другие нарушения.
Клинический диагноз не должен базироваться только на одном показателе, необходимо учитывать клинические и других лабораторных данных.
Состав набора
- Реагент 1. Буфер:Фосфатный буфер, 0.2 mol/l (моль/л).
- Реагент 2. Субстрат:крахмал по литнеру.
- Реагент 3. Раствор иода, 0.1H.
- Инструкция по использованию.
- Сертификат качества.
Аналитические характеристики
- Линейность измерительного диапазона: 3 – 36 mg/(sl) (мг/(секл)). Отклонение от линейности не превышает 10%. Если полученные результаты были больше, чем пределы линейности, образцы разбавляют раствором NaCl 9 g/l (г/л).
- Чувствительность не менее 3 mg/(sl) (мг/(секл)).
- Коэффициент вариации результатов определений – не более 10%.
Материал для исследования
- Сыворотка или плазма крови (рекомендуется использовать гепарин, в качестве антикоагулянта). Тестируемые сыворотки или плазмы должны быть тщательно отделены от форменных элементов крови не позднее, чем через 1 ч после взятия крови. Избегайте использования мутных, липидных и гемолитических образцов.
- Мочу для хранения довести до рН 7.0.
- Дуоденальное содержимое. Если полученные результаты были больше, чем пределы линейности, образцы разбавляют раствором NaCl 9 g/l (г/л).
Рекомендуемые разведения: моча разводится в 10 раз, дуоденальное содержимое – в 100 раз. Полученные результаты перемножают на коэффициент разбавления.
Перечень необходимого оборудования
- Спектрофотометрическое или колориметрическое оборудование с длиной волны 640 (600 – 700) nm (нм).
- Подходящие кюветы с толщиной оптического слоя 1 cm (см).
- Баня водяная с термостатом с температурой 37 ºС.
- Общее лабораторное оборудование.
Прим: Адаптации к полуавтоматическим и автоматическим приборам предоставляются по запросу
Подготовка реагентов
Перед использованием набор выдержать при комнатной температуре 30 мин (мин).
Приготовление рабочего реагента РР: смешать Р2 с Р1 в соотношении 1:24. РР стабилен 14 d(сут) при температуре 2-8 ºC в непрозрачной (темной) посуде.
Условия измерения:
- длина волны 640 nm (нм) – кювета с толщиной оптического слоя 1 cm (см)
- температура 37 ºC
Референтные величины
Основываясь на результатах исследований, проведенных бораториями, рекомендуем пользоваться нижеприведенными нормами. Вместе с тем согласно правилам GLP (Хорошей лабораторной практики), каждая лаборатория должна сама определить для себя параметры нормы, характерные для обследуемой популяции.
- сыворотка (плазма) 3.3-8.9 mg/(sl) (мг/(секл)) / 12-32 g/(hl) (г/(чл))
- моча 5.5-44.4 mg/(sl) (мг/(секл)) / 20-160 г/(hl) (г/(годл))
- дуоденальное содержимое 1.7-4.4 g/(sl) (г/(секл)) / 6-16 g/(hml) (г/(чмл))
- переход в дополнительные единицы: 1 mg/(sl) (мг/(секл)) = 3.6 g/(hl) (г/(чл)) = 0.0036 g/(hml) (г/(чмл))
Комплектация:
| 1 | 2 |
|---|---|
| Содержимое | 100 определ. |
| Р1 | 1 х 100 мл (мл) |
| Р2 | 1 х 5 мл (мл) |
| Р3 | 1 х 12 мл (мл) |