Сечовина гідролізується ферментативно з утворенням амонію (NH4+) і вуглекислого газу (CO2). Утворені іони аміаку реагують з саліцилатом і гіпохлоритом (NaClO), в присутності каталізатора нітропрусіда, з формуванням зеленого індофенола:

сечовина + H2O уреаза→ (NH4+)2 + CO2

NH4+ + Саліцилат + NaClO нітропрусід→ індофенол

Інтенсивність кольору пропорційна концентрації сечовини у зразку.

Клінічне значення

Сечовина є кінцевим результатом метаболізму білків. Утворюється в печінці при їх руйнуванні. Підвищений рівень сечовини в крові спостерігається при захворюванні нирок, серця, шлунковокишкових кровотечах, злоякісних пухлинах сечовивідних шляхів та передміхурової залози, хворобі Аддісона, посиленому розпаду білків, шоці, зневодненні, дієтах з надлишковим рівнем білків.

Зниження сечовини в крові буває фізіологічним при вагітності.

В сечі збільшення сечовини відбувається у хворих на злоякісну анемію, у наслідку гіперпротеїнової дієти, після прийому саліцилатів, при отруєнні фосфором; зниження – у хворих нефритом, ацидозом, на паренхіматозну жовтільницю, гостру дистрофію печінки, прогресуючи цирозом.

Клінічний діагноз не повинен базуватися на одному показникові, необхідно враховувати клінічні та інші лабораторні дані.

Склад набору

Реагент 1. Буфер: фосфат - 50 mmol/l (ммоль/л); ЭДТА - 2 mmol/l (ммоль/л); натрію саліцилат - 400 mmol/l (ммоль/л); натрію нітропрусид - 10 mmol/l (ммоль/л).
Реагент 2. Буфер: Натрію гіпохлорит - 140 mmol/l (ммоль/л); натрію гідроксид - 150 mmol/l (ммоль/л).
Реагент 3. Ензими: уреаза - 3000 U/ml (Од/мл).
Стандарт. Водний розчин сечовини. Точна концентрація вказана в сертифікаті якості.
Інструкція з використання
Сертифікат якості.

Аналітичні характеристики

Лінійність вимірювального діапазону: 2-33.3 mmol/l (ммоль/л). Відхилення від лінійності не перевищує 5%. Якщо отримані результати були більше, ніж межі лінійності, розведіть зразки 1:1 (в два рази) NaCl 9 g/l (г/л) та помножте результат на два.
Чутливість не менш 2 mmol/l (ммоль/л).
Коефіцієнт варіації результатів визначень – не більш 5%.

Матеріал для дослідження

Сироватка або гепаринізована плазма крові. Не використовуйте солі амонію або фтору в якості антикоагулянтів. Досліджувані сироватки або плазми повинні бути ретельно відокремлені від формених елементів крові не пізніше, ніж через 1 h (год) після взяття крові. Уникайте використання мутних, ліпідних та гемолітичних зразків.
Сеча добова: розвести зразок 1:49 (в 50 разів) дистильованою водою. Перемішати. Помножити результат на 50 (коефіцієнт розведення). Зберігайте зразки сечі при рН <4.

Зразки стабільні при 2-8ºC протягом 5 d (доб).

Перелік необхідного устаткування

Спектрофотометричне або колориметричне обладнання з довжиною хвилі 580 (540-600) nm (нм).
Відповідні кювети з товщиною оптичного шару 1 cm (см).
Загальне лабораторне обладнання.

Прим: Адаптації до напівавтоматичних і автоматичних приладів надаються за запитом.

Підготовка реагентів

Перед використанням набір витримати при кімнатній температурі протягом 30 min (хв).

Приготування робочого реагенту РР: змішати Р3 в одному флаконі з Р1. Закрити та обережно перемішати. При необхідності приготування робочого реагенту в меншім об’ємі слід змішати реагенти Р1 і Р3 в співвідношенні 100:1.

Увага! РР стабільний 14 d (доб) при температурі 2-8 ºC в непрозорому (темному) посуді.

Р2 готовий до використання.

Умови вимірювання:

довжина хвилі 580 (540-600) nm (нм)
кювета з товщиною оптичного шару 1 cm (см)
температура 37 ºC /15-25 ºC

Референтні величини

Ґрунтуючись на результатах досліджень, проведених лабораторіями, рекомендуємо користуватися нормами, приведеними нижче. Разом з тим, відповідно до правил GLP (Гарної лабораторної практики), кожна лабораторія повинна сама визначити для себе параметри норми, характерні для обстежуваної популяції.

Нормальні рівні сечовини становлять:

1	2
Вікові категорії	Рівні сечовини
Кров з пуповини	7.5-14.3 mmol/l (ммоль/л)
Недоношені ( ≤ 1 тижня)	1.1-8.9 mmol/l (ммоль/л)
Недоношені ( ≤ 1 року)	1.4-6.8 mmol/l (ммоль/л)
Нованороджені/діти	2.1-7.1 mmol/l (ммоль/л)
18-60 років	2.1-7.1 mmol/l (ммоль/л)
60-90 років	2.9-8.2 mmol/l (ммоль/л)
≥ 90 років	3.6-11.1mmol/l (ммоль/л)
сеча	430-710 mmol/d (ммоль/доб)

Комплектація

1	2	3	4
	2.029	2.030	2.031
Вміст	100 визн.	200 визн.	300 визн.
Р1	1 х 100 ml (мл)	1 х 200 ml (мл)	1 х 300 ml (мл)
Р2	1 х 100 ml (мл)	1 х 200 ml (мл)	1 х 300 ml (мл)
Р3	1 х 1 ml (мл)	2 х 1 ml (мл)	3 х 1 ml (мл)
Стандарт	1 х 1 ml (мл)	1 х 2 ml (мл)	1 х 3 ml (мл)