Сечова кислота окислюється уріказой до алантоіна і пероксиду водню (2H2O2), який під впливом пероксидази (ПОД, POD), 4-амінофеназона (4-АФ) і 2-4-дихлорфенола сульфаната (ДХФС) утворює червоний хіниноаміновий комплекс:

Сечова кислота + 2H2O + O2 уріказа →алантоін + CO2 + 2H2O2

2H2O2 + 4-АФ + ДХФС ПОД→ хіниноамін + 4H2O

Інтенсивність забарвлення комплексу прямо пропорційна концентрації сечової кислоти в зразку.

Клінічне значення

Сечова кислота та її солі є кінцевим продуктом метаболізму пуріна. При прогресуючий нирковій недостатності відбувається затримка в крові креатиніну і сечової кислоти. Підвищення рівня сечової кислоти може свідчити про ниркову недостатність, але в основному пов'язано з подагрою.

Клінічний діагноз не повинен базуватися тільки на одному показникові, необхідно враховувати клінічні та інші лабораторні дані.

Склад набору

Реагент 1. Буфер: фосфат рН 7.4 - 50 mmol/l (ммоль/л); ДХФС - 4 mmol/l (ммоль/л).
Реагент 2. Ензими: уріказа - 60 U/l (Од/л); пероксидаза - 660 U/l (Од/л); аскорбат оксидаза - 200 U/l (Од/л); 4-амінофеназон - 1 mmol/l (ммоль/л).
Стандарт. Водний розчин сечової кислоти. Точна концентрація вказана в сертифікаті якості.
Інструкція з використання.
Сертифікат якості.

Аналітичні характеристики

Лінійність вимірювального діапазону: 12 - 1200 µmol/l (мкмоль/л).
Відхилення від лінійності не перевищує 5%. Якщо отримані результати були більше, ніж межі лінійності, розведіть зразки 1:1 (в два рази) NaCl 9 g/l (г/л) та помножте результат на два.
Чутливість не менш 12 µmol/l (мкмоль/л).
Коефіцієнт варіації результатів визначень – не більш 5%.

Матеріал для дослідження

Сироватка або плазма крові. Досліджувані сироватки або плазми повинні бути ретельно відокремлені від формених елементів крові не пізніше, ніж через 1 h (год) після взяття крові. Уникайте використання мутних, ліпідних та гемолітичних зразків. Зразки стабільні протягом 3-5 d (доб) при 2-8 ºC або 6 mth (міс) при -20 ºC.
Добова сеча стабільна 4 d (доб) при 15-25 ºC, рН > 8. Розвести зразок 1/50 в дистильованої воді. Помножте результат на 50 (коефіцієнт розведення). Якщо сеча мутна, підігрійте зразок до 60 ºC 10 min (хв) до розчинення осаду уратів і сечової кислоти. Не заморожувати!

Перелік необхідного устаткування

Спектрофотометричне або колориметричне обладнання з довжиною хвилі 520 nm (нм).
Відповідні кювети з товщиною оптичного шару 1 cm (см).
Загальне лабораторне обладнання.

Прим: Адаптації до напівавтоматичних і автоматичних приладів надаються за запитом.

Підготовка реагентів

Перед використанням набір витримати при кімнатній температурі протягом 30 min (хв).

Приготування робочого реагенту РР: змішати рівні обсяги Р1 (буфер) і Р2 (ензими).

РР стабільний 1 wk (тижд) при зберіганні в холодильнику 2-8 ºC або 4 d (доб) при 15-25 ºC.

Умови вимірювання:

довжина хвилі 520 (490-550) nm (нм)
кювета з товщиною оптичного шару 1 cm (см)
температура 37 ºC /15-25 ºC

Референтні величини

Ґрунтуючись на результатах досліджень, проведених лабораторіями, рекомендуємо користуватися нормами, приведеними нижче. Разом з тим, відповідно до правил GLP (Гарної лабораторної практики), кожна лабораторія повинна сама визначити для себе параметри норми, характерні для обстежуваної популяції.

Сироватка або плазма:

жінки 25 - 68 mg/l (мг/л) = 149 - 405 µmol/l (мкмоль/л)
чоловіки 36 - 77 mg/l (мг/л) = 214 - 458 µmol/l (мкмоль/л)

Сеча: 250 - 750 mg/d (мг/доб) = 1.49 – 4.5 mmol/d (ммоль/доб)

Перехід в додаткові одиниці: mg/l (мг/л) х 5.95 = µmol/l (мкмоль/л)

Комплектація

1	2	3	4
	2.041	2.023	2.024
Вміст	50 визн.	100 визн.	500 визн.
Р1	1 х 25 ml (мл)	1 х 50 ml (мл)	1 х 250 ml (мл)
Р2	1 х 25 ml (мл)	1 х 50 ml (мл)	1 х 250 ml (мл)
Стандарт	1 х 2 ml (мл)	1 х 3 ml (мл)	1 х 10 ml (мл)