Принцип методу
Двостадійна реакція. У першій реакції креатиназа та саркозиноксидаза використовується у ферментативному гідролізі ендогенного креатину з утворенням пероксиду водню, який видаляється каталазою. У другій реакції каталаза інгібується азидом натрія, потім додається креатиназа і 4-аміноантипірин (4-АA), і тоді креатин, утворений креатиніназою, послідовно гідролізується креатиназою і саркозиноксидазою з утворенням пероксиду водню. Цей знову утворений пероксид водню вимірювали у зв'язаній реакції, що каталізується пероксидазою, з N-етил-н-сульфопропілметолуїдином (TOPS) / 4-AA як хромогеном.
Клінічне значення
Креатинін є результатом розкладання креатину, компоненту м'язів, він може перетворюватися на АТФ, який є джерелом високої енергії для клітин. Виробництво креатиніну залежить від зміни м'язової маси, воно мало змінюється, а рівні зазвичай дуже стабільні. Виводиться нирками. При прогресуючій нирковій недостатності спостерігається затримка у крові сечовини, креатиніну та сечової кислоти.
Підвищений рівень креатиніну може вказувати на ниркову недостатність.
Клінічний діагноз не повинен базуватися на одному показникові, необхідно враховувати клінічні та інші лабораторні дані.
Склад набору
- Реагент 1. MOPS 25 mmol/l (ммоль/л), TOPS 0.5 mmol/l (ммоль/л), креатиназа 10 KU/l (кОд/л), саркозиноксидаза 5 KU/l (кОд/л), каталаза 3 KU/l (кОд/л), EDTA 1 mmol/l (ммоль/л), pH 7,5.
- Реагент 2. MOPS 90 mmol/l (ммоль/л), креатиніназа 30 KU/l (кОд/л), пероксидаза 10 KU/l (кОд/л), азид натрію 0.5 g/l (г/л), рН 7,5.
- Стандарт. Водний розчин креатиніну. Точна концентрація вказана в сертифікаті якості.
- Інструкція з використання.
- Сертифікат якості.
Аналітичні характеристики
- Лінійність вимірювального діапазону: 1.0-180 mg/l (мг/л). Відхилення від лінійності не перевищує 3%. Якщо отримані результати були більше, ніж межі лінійності, розведіть зразки 1:1 (в два рази) NaCl 9 g/l (г/л) та помножте результат на два.
- Чутливість не менш 1.0 mg/l (мг/л).
- Коефіцієнт варіації результатів визначень – не більш 3 %.
Матеріал для дослідження
Сироватка або плазма крові. Досліджувані сироватки або плазми повинні бути ретельно відокремлені від формених елементів крові не пізніше, ніж через 1 h (год) після взяття крові. Уникайте використання мутних, ліпідних та гемолітичних зразків.
Сеча добова. Розведіть свіжу сечу 1/50 дистильованою водою. Помножте результат на 50 (коефіцієнт розведення зразка).
Креатинін стабільний 1 день при 2-8 ºC.
Перелік необхідного устаткування
- Спектрофотометричне або колориметричне обладнання з довжиною хвилі 525-565 nm (нм).
- Термостатична баня 37 °С.
- Відповідні кювети з товщиною оптичного шару 1 сm (см).
- Загальне лабораторне обладнання.
Прим: Адаптації до напівавтоматичних і автоматичних приладів надаються за запитом.
Підготовка реагентів
Перед використанням набір витримати при кімнатній температурі протягом 30 min (хв).
Всі реагенти готові до використання.
Умови вимірювання:
- довжина хвилі 545 (525-565) nm (нм)
- кювета з товщиною оптичного шару 1 сm (см)
- температура 37 ºC
Референтні величини
Грунтуючись на результатах досліджень, проведених лабораторіями, рекомендуємо користуватися нормами, приведеними нижче. Разом з тим, відповідно до правил GLP (Гарної лабораторної практики), кожна лабораторія повинна сама визначити для себе параметри норми, характерні для обстежуваної популяції.
Сироватка або плазма:
- Чоловіки 9-13 mg/l (мг/л).
- Жінки 6-11 mg/l (мг/л).
Сеча:
- Чоловіки 14-26 mg/kg/24h (мг/кг/доб).
- Жінки 11-20 mg/kg/24h (мг/кг/доб).
Комплектація
| 1 | 2 | 3 |
|---|---|---|
| 2.049 | 2.050 | |
| Вміст | 60 визн. | 120 визн. |
| Р1 | 1 х 30 ml (мл) | 1 х 60 ml (мл) |
| Р2 | 1 х 10 ml (мл) | 1 х 20 ml (мл) |
| Стандарт | 1 х 4 ml (мл) | 1 х 6 ml (мл) |