Принцип метода
Двухстадийная реакция. В первой реакции креатиназа и саркозиноксидаза используется в ферментативном гидролизе эндогенного креатина с образованием пероксида водорода, удаляемого каталазой. Во второй реакции каталаза ингибируется азидом натрия, затем добавляется креатиназа и 4-аминоантипирин (4-AA), и тогда креатин, образованный креатининазой, гидролизуется последовательно креатиназой и саркозиноксидазой с образованием пероксида водорода. Этот вновь образованный пероксид водорода измеряли в связанной катализируемой реакции пероксидазой с N-этил-н-сульфопропилметолуидином (TOPS)/4-AA как хромогеном.
Клиническое значение
Креатинин является результатом разложения креатина, компонента мышц, он может превращаться в АТФ, являющийся источником высокой энергии для клеток. Производство креатинина зависит от изменения мышечной массы, оно мало меняется, а уровни обычно очень стабильны. Выводится почками. При прогрессирующей почечной недостаточности наблюдается задержка крови мочевины, креатинина и мочевой кислоты.
Повышенный уровень креатинина может указывать на почечную недостаточность.
Клинический диагноз не должен основываться на одном показателе, необходимо учитывать клинические и другие лабораторные данные.
Состав набора
- Реагент 1. MOPS 25 mmol/l (ммоль/л), TOPS 0.5 mmol/l (ммоль/л), креатиназа 10 KU/l (код/л), саркозиноксидаза 5 KU/l (код/л), каталаза 3 KU/l (к/l) (ммоль/л), pH 7,5.
- Реагент 2. MOPS 90 mmol/l (ммоль/л), креатининаза 30 KU/l (код/л), пероксидаза 10 KU/l (код/л), азид натрия 0.5 g/l (г/л), рН 7,5.
- Стандарт. Водный раствор креатинина. Точная концентрация указана в сертификате качества.
- Инструкция по использованию.
- Сертификат качества.
Аналитические характеристики
- Линейность измерительного диапазона: 1.0-180 мг/л (мг/л). Отклонение от линейности не превышает 3%. Если полученные результаты были больше пределов линейности, разведите образцы 1:1 (в два раза) NaCl 9 g/l (г/л) и умножьте результат на два.
- Чувствительность не менее 1,0 мг/л (мг/л).
- Коэффициент вариации результатов определений – не более 3%.
Материал для исследования
Сыворотка или плазма крови. Тестируемые сыворотки или плазмы должны быть тщательно отделены от форменных элементов крови не позднее, чем через 1 ч после взятия крови. Избегайте использования мутных, липидных и гемолитических образцов.
Моча суточная. Разведите свежую мочу 1/50 дистиллированной водой. Умножьте результат на 50 (коэффициент разбавления образца).
Креатинин стабилен 1 день при 2-8 ºC.
Перечень необходимого оборудования
- cпектрофотометрическое или колориметрическое оборудование с длиной волны 525-565 нм (нм).
- термостатическая баня 37 °С.
- подходящие кюветы с толщиной оптического слоя 1 см (см).
- общее лабораторное оборудование.
Прим: Адаптации к полуавтоматическим и автоматическим приборам предоставляются по запросу.
Подготовка реагентов
Перед использованием набор выдержать при комнатной температуре 30 мин (мин).
Все реагенты готовы к использованию.
Условия измерения:
- длина волны 545 (525-565) nm (нм)
- кювета с толщиной оптического слоя 1 см (см)
- температура 37 ºC
Референтные величины
Основываясь на результатах исследований, проведённых лабораториями, рекомендуем пользоваться нормами, приведенными ниже. Вместе с тем согласно правилам GLP (Хорошей лабораторной практики), каждая лаборатория должна сама определить для себя параметры нормы, характерные для обследуемой популяции.
Сыворотка или плазма:
- мужчины 9-13 mg/l (мг/л).
- женщины 6-11 mg/l (мг/л).
Сеча:
- мужчины 14-26 mg/kg/24h (мг/кг/сут).
- женщины 11-20 мг/кг/24 ч (мг/кг/сут).
Комплектация
| 1 | 2 | 3 |
|---|---|---|
| 2.049 | 2.050 | |
| Содержимое | 60 определ. | 120 определ. |
| Р1 | 1 х 30 мл (мл) | 1 х 60 мл (мл) |
| Р2 | 1 х 10 мл (мл) | 1 х 20 мл (мл) |
| Стандарт | 1 х 4 мл (мл) | 1 х 6 мл (мл) |