Принцип методу
Вимірювання базуються на реакції креатиніну з пікратом натрію по методу Яффе. Креатинін реагує з лужним пікратом формуючи червоний комплекс. Інтенсивність кольору пропорційна концентрації креатиніну в зразку.
Клінічне значення
Креатинін утворюється в результаті розпаду креатину, компоненту м'язів. Вироблення креатиніну залежить від зміни м'язової маси та його рівень в основному стабільний і слабко варіюється. Виділяється нирками. При гострій нирковій недостатності у крові та сечі зростає рівень креатиніну і сечовини. В сироватці підвищений рівень креатиніну може вказувати не тільки на ниркову недостатність і прогресуючі захворювання нирок, але і на кишкову непроходимість, важкий діабет, декомпенсації серця, механічну жовтільницю, вагітність, голодування. Зниження рівня – при анеміях, після назначення АКТГ.
В сечі підвищення залежить від харчування, при посиленой роботі м'язів, лихоманних станах, недостатності функцій печінки, пневмонії. Зниження – при м'язовій атрофії, голодуванні, дегенерації нирок, лейкемії, амілоїдозі нирок.
Клінічний діагноз не повинен базуватися тільки на одному показникові, необхідно враховувати клінічні та інші лабораторні дані.
Склад набору
- Реагент 1. Пікриновий реагент: пікринова кислота – 17.5 mmol/l (ммоль/л).
- Реагент 2. Лужний реагент: гідроксид натрію - 0.29 mmol/l (ммоль/л).
- Стандарт. Водний розчин креатиніну. Точна концентрація вказана в сертифікаті якості.
- Інструкція з використання.
- Сертифікат якості.
Аналітичні характеристики
- Лінійність вимірювального діапазону: 26 - 1000 µmol/l (мкмоль/). Відхилення від лінійності не перевищує 5%. Якщо отримані результати були більше, ніж межі лінійності, розведіть зразки 1:1 (в два рази) NaCl 9 g/l (г/л) та помножте результат на 2.
- Чутливість не менш 26 µmol/l (мкмоль/л).
- Коефіцієнт варіації результатів визначень – не більш 5%.
Матеріал для дослідження
1.Сироватка або гепаринізована плазма крові. Досліджувані сироватки або плазми повинні бути ретельно відокремлені від формених елементів крові не пізніше, ніж через 1 h (год) після взяття крові. Уникайте використання мутних, ліпідних та гемолітичних зразків. Зразки стабільні протягом 24 h (год) при 2-8 ºC. 2. Сеча добова: розвести зразок 1:50 дистильованою водою. Помножити результат на 50 (фактор розведення). Зразки стабільні 7 d (доб) при 2-8 ºC.
Перелік необхідного устаткування
- Спектрофотометричне або колориметричне обладнання з довжиною хвилі 492 nm (нм).
- Відповідні кювети з товщиною оптичного шару 1 cm (см).
- Загальне лабораторне обладнання.
Прим: Адаптації до напівавтоматичних і автоматичних приладів надаються за запитом
Підготовка реагентів
Перед використанням набір витримати при кімнатній температурі протягом 30 min (хв).
Приготування робочого реагенту РР: змішати рівні об'єми Р1 (пікриновий реагент) і Р2 (лужний реагент).
РР стабільний 15 d (доб) при температурі 2-8 ºC.
Умови вимірювання:
- довжина хвилі 492 (490-510) nm (нм)
- кювета з товщиною оптичного шару 1 cm (см)
- температура 37 ºC / 15-25 ºC
Референтні величини
Ґрунтуючись на результатах досліджень, проведених лабораторіями, рекомендуємо користуватися нормами, приведеними нижче. Разом з тим, відповідно до правил GLP (Гарної лабораторної практики), кожна лабораторія повинна сама визначити для себе параметри норми, характерні для обстежуваної популяції
Нормальні рівні креатиніну становлять:
| 1 | 2 | 3 |
|---|---|---|
| Сироватка або плазма | Сеча | |
| чоловіки | 7 - 14 mg/l (мг/л) | 10 - 20 mg/kg/d (мг/кг/доб) |
| 61.8 - 123.7 µmol/l (мкмоль/л) | 88 - 177 µmol/kg/d (мкмоль/кг/доб) | |
| жінки | 6 - 11 mg/l (мг/л) | 8 - 18 mg/kg/d (мг/кг/доб) |
| 53.0 - 97.2 µmol/l (мкмоль/л) | 71 - 177 µmol/kg/d (мкмоль/кг/доб) |
Перехід в додаткові одиниці: mg/l (мг/л) х 8.84 = µmol/l (мкмоль/л)