Аланинаминотран сфераза СпЛ (АЛТ СпЛ) 600 мл - 250/125/60 опред

Принцип метода

В основе определения активности АЛТ с динитрофенилгидрозином лежит метод Райтмана-Френкеля. Аланинаминотрансфераза в присутствии а-кетоглютарата катализирует реакцию переаминовки L-аланина с образованием пирувата.

L-аланин + α-кетоглутарат АЛТ --> глутамат + пируват

Пируват с 2,4-динитрофенилгидрозином в щелочной среде образует динитрофенилгидразон, Интенсивность цвета пропорциональна концентрации АЛТ в образце.

Клиническое значение

АЛТ – фермент, участвующий в метаболизме аминокислот в клетке.

Наибольшее содержание в печени, почках, поджелудочной железе, сердечной мышце, скелетных мышцах. В клетке фермент локализуется в цитоплазме, поэтому любое повреждение клеток приводит к увеличению его содержания (активности) в крови. Органические поражения при острых или хронических заболеваниях, сопровождающиеся некрозом клеток любой этиологии, приводят к выходу АЛТ из области поражения в кровяное русло, что приводит к повышению активности в крови. Увеличение активности АЛТ в сыворотке крови наиболее характерно при различных заболеваниях печени, сопровождающихся некрозами (гепатиты, токсическое воздействие). АЛТ является показателем оценки тяжести протекания вирусных гепатитов В и С. Одновременное определение активности двух аминотрансфераз (АЛТ и АСТ) является ценным диагностическим тестом. Активность АЛТ возрастает при инфаркте миокарда, но в меньшей степени, чем активность АСТ (аспартотаминотрансфераза). Для уточнения диагноза производят расчет коэффициента де Ритиса: соотношение активностей АСТ/АЛТ. В норме это составляет 1.33±0.42. Резкое превышение этого показателя свидетельствует о впечатлении сердечной мышцы. Также в качестве биомаркера в диагностике инфаркта миокарда рекомендуется использовать определение активности креатинфосфокиназы МВ-типа (КФКМВ).

Снижение коэффициента до 0.6 – 0.8 характерно при некрозе печеночных клеток при вирусных гепатитах. Клинический диагноз не должен основываться на одном показателе, необходимо учитывать клинические и другие лабораторные данные.

Состав набора

1. Реагент 1. Субстрат: DL-Аланин – 200 mmol/l (ммоль/л); - кетоглютарат - 2 mmol/l (ммоль/л).
2. Реагент 2. Проявитель: 2,4-динитрофенилгидразин - 1 ммоль/л (ммоль/л).
3. Реагент 3. Натрия гидроксид 0.4 N концентрат 20х.
4. Калибратор. Раствор пирувата – 2.0 mmol/l (ммоль/л).
5. Инструкция по использованию.
6. Сертификат качества.

Аналитические характеристики

1. Линейность измерительного диапазона: 0.028 – 1.01 µkat/l (мккат/л). Отклонение от линейности не превышает 6%. Если полученные результаты были больше, чем пределы линейности, разведите образцы NaCl 9 g/l (г/л) и умножьте результат на фактор разведения.
2. Чувствительность не менее 0.028 µkat/l (мккат/л).
3. Коэффициент вариации результатов определений – не более 6%.

Материал для исследования

Сыворотка или плазма крови. Тестируемые сыворотки или плазмы должны быть тщательно отделены от форменных элементов крови не позднее, чем через 1 ч после взятия крови. Избегайте использования мутных, липидных и гемолитических образцов.

Перечень необходимого оборудования

– Спектрофотометрическое или колориметрическое оборудование с длиной волны 505 nm (нм).

• подходящие кюветы с толщиной оптического слоя 1 cm (см).
• Термостатическая водяная баня 37 ºC.
• общее лабораторное оборудование. Прим: Адаптации к полуавтоматическим и автоматическим приборам предоставляются по запросу

Подготовка реагентов

Перед использованием набор выдержать при комнатной температуре 30 мин (мин). Р1, Р2 готовы к использованию. Р3 развести дистиллированной водой 1:19 (в 20 раз).

Условия измерения:

• длина волны 505 (500-600) nm (нм)
• кювета с толщиной оптического слоя 1 cm (см)
• температура 15-25-37 ºC

Референтные величины

Основываясь на результатах исследований, проведенных лабораториями, рекомендуем пользоваться нижеприведенными нормами. Вместе с тем согласно правилам GLP (Хорошей лабораторной практики), каждая лаборатория должна сама определить для себя параметры нормы, характерные для обследуемой популяции.

Нормальные уровни АЛТ в сыворотке крови: 0.028-0.19 µkat/l (мккат/л) или 0.1-0.68 µmol/hml (мкмоль/чмл) при температуре 37 ºC.

Переход в дополнительные единицы: U/l (Од/л) х 0.01667 = µkat/l (мккат/л). µkat/l (мккат/л) х 3.6 = µmol/hml (мкмоль/чмл)

Комплектация