Принцип методу
Вимірювання вмісту кальцію в пробі ґрунтується на утворенні кольорового комплексу кальцію з о-крезолфталеїном в лужному середовищі:
Ca 2+ + о-крезолфталеїн ОН-→ Кольоровий комплекс
Інтенсивність кольору пропорційна концентрації кальцію в зразку.
Клінічне значення
Кальцій є найбільш поширеним і одним з найбільш важливих мікроелементів в організмі людини.
Близько 99% кальцію знаходиться в кістках.
Серед причин підвищення кальцію є ракові захворювання, велике споживання вітаміну D, затримка виділення через нирки, остеопороз, саркоідоз, тиреотоксикоз, гіперпаратироідизм. Низький рівень кальцію спостерігається при гіпопаратироїдизмі, псевдопаратироїдизмі, при нестачі вітаміну Д, недоїданні та порушеннях роботи кишечнику, зниженні рівня альбуміну.
Клінічний діагноз не повинен базуватися на одному показникові, необхідно враховувати клінічні та інші лабораторні дані.
Склад набору
- Реагент 1. Буфер: етаноламін - 500 mmol/l (ммоль/л).
- Реагент 2. Хромоген: о-крезолфталеїн – 0.62 mmol/l (ммоль/л); 8-гідрохінолін - 69 mmol/l (ммоль/л).
- Стандарт. Водний розчин кальцію. Точна концентрація вказана в сертифікаті якості.
- Інструкція з використання.
- Сертифікат якості.
Аналітичні характеристики
- Лінійність вимірювального діапазону: 0.125 - 4 mmol/l (ммоль/л). Відхилення від лінійності не перевищує 4%. Якщо отримані результати були більше, ніж межі лінійності, розведіть зразки 1:1 (в два рази) NaCl 9 g/l (г/л) та помножте результат на два.
- Чутливість не менш 0.125 mmol/l (ммоль/л).
- Коефіцієнт варіації результатів визначень – не більш 4%.
Матеріал для дослідження
- Сироватка або плазма крові. Досліджувані сироватки або плазми повинні бути ретельно відокремлені від формених елементів крові не пізніше, ніж через 1 h (год) після взяття крові. Уникайте використання мутних, ліпідних та гемолітичних зразків. Увага! Як антикоагулянт крові використовувати тільки гепарин. Оксалати, ЕДТА, фториди, цитрат не застосовувати, оскільки вони заважають визначенню кальцію.
- Сеча. Зібрати 24-годинну сечу в спеціальний контейнер для збору, що не містить кальцій. Контейнер для збору повинен містити 10 ml (мл) 50 % азотної кислоти (розчин). Записати обсяг. Розвести зразок 1:1 (в два рази) дистильованою водою. Результат помножити на два. Зразки стабільні протягом 10 d (доб) при 2-8 ºC.
Увага! Як антикоагулянт крові використовувати тільки гепарин. Оксалати, ЕДТА, фториди, цитрат не застосовувати, оскільки вони заважають визначенню кальцію.
Перелік необхідного устаткування
- Спектрофотометричне або колориметричне обладнання з довжиною хвилі 570 nm (нм).
- Відповідні кювети з товщиною оптичного шару 1 cm (см).
- Загальне лабораторне обладнання.
Прим: Адаптації до напівавтоматичних і автоматичних приладів надаються за запитом
Підготовка реагентів
Перед використанням набір витримати при кімнатній температурі протягом 30 min (хв).
Всі реагенти готові до використання.
Умови вимірювання:
- довжина хвилі 570 (550-590) nm (нм)
- кювета з товщиною оптичного шару 1 cm (см)
- температура 37 ºC / 15-25 ºC
Референтні величини
Ґрунтуючись на результатах досліджень, проведених лабораторіями, рекомендуємо користуватися нормами, приведеними нижче. Разом з тим, відповідно до правил GLP (Гарної лабораторної практики), кожна лабораторія повинна сама визначити для себе параметри норми, характерні для обстежуваної популяції.
Нормальні рівні кальцію становлять:
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
|---|---|---|---|---|
| Сироватка або плазма | Сеча | |||
| mg/l (мг/л) | mmol/l (ммоль/л) | mg/d (мг/доб) | mmol/d (ммоль/ доб) | |
| дорослі | 85-105 | 2.1-2.6 | 50-300 | 1.25-7.5 |
| діти | 100-120 | 2.5-3 | 80-160 | 2-4 |
| новонароджені | 80-130 | 2-3.25 |
Перехід в додаткові одиниці: mg/l (мг/л) х 0.025= mmol/l (ммоль/л)
Комплектація
| 1 | 2 | 3 | 4 |
|---|---|---|---|
| 3.009 | 3.010 | 3.011 | |
| Вміст | 100 визн. | 150 визн. | 300 визн. |
| Р1 | 1 х 100 ml (мл) | 1 х 150 ml (мл) | 1 х 300 ml (мл) |
| Р2 | 1 х 100 ml (мл) | 1 х 150 ml (мл) | 1 х 300 ml (мл) |
| Стандарт | 1 х 2 ml (мл) | 1 х 3 ml (мл) | 1 х 6 ml (мл) |