У присутності тіо-НАД фермент 3-α гідроксистероїд дегідрогеназа (3-α HSD) перетворює жовчні кислоти на 3-кетостероїди та тіо-НАДН. Реакція є оборотною, і 3-α HSD може перетворювати 3-кето стероїди та тіо-НАДН на жовчні кислоти та тіо-НАДН. У присутності надлишку НАДН, ферментний цикл відбувається ефективно, а швидкість утворення тіо-НАДН визначається шляхом вимірювання зміни поглинання при 405 нм.

Клінічне значення

Висновки жовчних кислот сироватки крові натщесерце можуть бути використані для діагностики та прогнозування захворювань печінки. Рівні підвищуються при багатьох захворюваннях печінки, наприклад, гепатиті та склерозі печінки. Аномальні рівні у пацієнтів натщесерце або одразу після їжі можуть бути використані для виявлення захворювань та пошкоджень печінки, порушення функції печінки, дисфункції кишечника та, можливо, закупорки жовчного міхура. Вимірювання жовчних кислот може виявити деякі форми захворювань печінки раніше, ніж стандартні печінкові проби, оскільки рівні жовчних кислот відповідають функції печінки, а не її пошкодженню. У ветеринарії вимірювання жовчних кислот вважається найкращим показником захворювання печінки.

Клінічний діагноз не повинен базуватися тільки на одному показникові, необхідно враховувати клінічні та інші лабораторні дані.

Склад набору

Реагент 1. Буфер: тіо-НАДН – 1 g/l (г/л); консервант 0,1%.
Реагент 2. Буфер: НАДН – 6 g/l (г/л), 3-α HSD – 12 кU/l (кОд/л); консервант 0,1%.
Інструкція з використання.
Сертифікат якості.

Додаткові реагенти

СпЛ Загальні жовчні кислоти Калібратор постачається окремо.

Аналітичні характеристики

Лінійність вимірювального діапазону: 1,47-150 µmol/l (µмоль/л). Відхилення від лінійності не перевищує 5%. Якщо отримані результати були більше, ніж межі лінійності, розведіть зразки 1:4 (в два рази) NaCl 9 g/l (г/л) та помножте результат на 5.
Чутливість не менш 1,47 µmol/l (µмоль/л).
Коефіцієнт варіації результатів визначень – не більш 5%.

Матеріал для дослідження

Сироватка та плазма крові з ЕДТА або літій-гепарином. Досліджувані сироватки або плазми повинні бути ретельно відокремлені від формених елементів крові не пізніше, ніж через 1 h (год) після взяття крові.

Зразки стабільні протягом 7 днів при 2-8 °С або 3 місяці при -20°С.

Перелік необхідного устаткування

Спектрофотометричне або колориметричне обладнання з довжиною хвилі 405 nm (нм).
Відповідні кювети з товщиною оптичного шару 1 cm (см).
Загальне лабораторне обладнання.

Прим: Адаптації до напівавтоматичних і автоматичних приладів надаються за запитом

Підготовка реагентів

Перед використанням набір витримати при кімнатній температурі протягом 30 min (хв).

Реагенти готові до використання.

Умови вимірювання:

довжина хвилі 405 nm (нм)
кювета з товщиною оптичного шару 1 cm (см)
температура 37 ºC / 15-25 ºC

Референтні величини

Ґрунтуючись на результатах досліджень, проведених лабораторіями, рекомендуємо користуватися нормами, приведеними нижче. Разом з тим, відповідно до правил GLP (Гарної лабораторної практики), кожна лабораторія повинна сама визначити для себе параметри норми, характерні для обстежуваної популяції.

Нормальні рівні зальних жовчних кислот становлять 0-10 µmol/l (µмоль/л).

Комплектація