Набір призначений для використання як промивний розчин в клініко-діагностичних лабораторіях і науково-дослідницькій практиці.
- Набір розрахований на відповідну кількість промивань відповідно обраної методики.
- Зберігання набору - при температурі від плюс 2 °С до плюс 25 °С.
- Гарантійний термін придатності набору - 12 місяців від дня виготовлення.
- Набір призначений для застосування in vitro тільки кваліфікованим лабораторним персоналом.
ПРИНЦИП МЕТОДУ
ФСБ-T (фосфатно-сольовий буфер з детергентом на основі протоколів CSH 3) - це забуферений фосфатом ізотонічний розчин, який зазвичай використовується як промивний розчин для мембран вестерн-блоттингу, для фіксованих PFA (параформальдегід) зразків, для імуногістології та для лунок мікротитраційних планшетів для аналізів ELISA. Розчин складається зі стабілізаторів рН, солей і детергентів, призначених для ефективного видалення надлишку матеріалу з мембран і лунок мікропланшета без порушення реакції зв’язування антигену/антитіла. У належному буферному середовищі незв’язані компоненти можна вимити без пригнічення взаємодії зв’язування антигену з антитілом, тим самим зменшуючи неспецифічний фон і посилюючи специфічний сигнал.
СКЛАД НАБОРУ
- Фосфатно-сольовий буфер (ФСБ-Т) рН 7,4 - 1 флакон з (1000 ± 40) мл.
ПРИГОТУВАННЯ РОБОЧОГО РОЗЧИНУ
Фосфатно-сольовий буфер (ФСБ-Т) готовий до використання та стабільний до закінчення гарантійного терміну придатності (при дотриманні умов зберігання, вказаних на упаковці).
ПРОВЕДЕННЯ ПРОМИВАННЯ
Наприклад, для вестерн-блот мембран 1: Необхідно промивати мембрану після блокування та між інкубаціями з антитілами. Промивання видаляє незв’язані або агреговані білки, присутні на блоті, а також незв’язані реагенти, які можуть заважати виявленню цільової молекули. Промивання допомагає зменшити фоновий сигнал, підвищуючи чутливість аналізу за рахунок збільшення співвідношення сигнал/шум і уможливлюючи якісний і кількісний аналіз білка, що досліджується.
Етапи промивання:
- Процедура Промивання зазвичай проводиться при кімнатній температурі.
- Блот промивають, поміщаючи мембрану в об’єм промивного буфера, який повністю занурює мембрану. Наприклад, для середнього блоту розміром 10 см² знадобиться >40 мл промивного буфера, ми зазвичай використовуємо 100 мл.
- Мембрану інкубують у промивному буфері протягом 5-10 хвилин і постійно перемішують за допомогою качалки, шейкера або відповідного блот-процесора.
- Потім процес промивання повторюється між кожною інкубацією реагенту.
ЗАСТЕРЕЖЕННЯ
Необхідне застосування спеціального захисного одягу і рукавичок. Необхідно уникати попадання мікроорганізмів в оточуюче середовище. Треба ретельно дотримуватися спеціальних інструкцій та техніки безпеки.
УТИЛІЗАЦІЯ
Всі зразки для аналізу вважають за матеріал, який може бути інфікований, і разом з можливими залишками реактивів підлягає знищенню відповідно до затверджених внутрішньолікарняних правил. Паперову упаковку здайте в макулатуру, виполоскану тару - в сортоване сміття.