Принцип методу
Гамма-глютамілтрансфераза (γ-ГТ) каталізує передачу γ-глютаміл групи з γ-глютаміл-р-нітроаніліда на акцепторний гліцилгліцин, відповідно до наступної реакції:
γ-L-глутаміл-3-карбоксі-4-нітроанілід + гліцилгліцин γ-ГТ L-γ-глутамілгліцин + 2-нітро-5-амінобензойна кислота
Каталітична активність γ-ГТ у зразку пропорційна рівню зміни 2-нітро-5-амінобензойної кислоти і вимірюється на фотометрі.
Клінічне значення
γ-ГТ є клітинним ферментом і широко розповсюджується у тканинах організму, в першу чергу,у нирках, підшлунковій залозі, печінці і простаті.
Вимірювання γ-ГТ активно застосовують при діагностиці та лікуванні таких захворювань як застій жовчі, цироз або пухлини печінки.
Клінічний діагноз не повинен базуватися на одному показникові, необхідно враховувати клінічні та інші лабораторні дані.
Склад набору:
- Реагент 1. Буфер: трис рН 8.6 - 100 mmol/l (ммоль/л); гліцилгліцин -100 mmol/l (ммоль/л).
- Реагент 2. Субстрат: L-γ-глутаміл-3-карбоксі-4-нітроанілід - 3 mmol/l (ммоль/л).
- Інструкція з використання.
- Сертифікат якості.
Аналітичні характеристики
- Лінійність вимірювального діапазону: 3 - 250 U/l (Од/л). Відхилення від лінійності не перевищує 5%. Якщо отримані результати були більше, ніж межі лінійності, розведіть зразки 1:1 (в два рази) NaCl 9 g/l (г/л) та помножте результат на два.
- Чутливість не менш 3 U/l (Од/л).
- Коефіцієнт варіації результатів визначень – не більш 5%.
Матеріал для дослідження
Сироватка крові. Досліджувані сироватки повинні бути ретельно відокремлені від формених елементів крові не пізніше, ніж через 1 h (год) після взяття крові. Уникайте використання мутних, ліпідних та гемолітичних зразків.
Сироватка стабільна 8 h (год) при температурі 15-25 ºC, 3 d (доб) при 2-8 ºC, 1 mth (міс) при -20 ºC.
Перелік необхідного устаткування
- Спектрофотометричне або колориметричне обладнання з довжиною хвилі 405 nm (нм).
- Відповідні кювети з товщиною оптичного шару 1 cm (см).
- Загальне лабораторне обладнання. Прим: Адаптації до напівавтоматичних і автоматичних приладів надаються за запитом.
Підготовка реагентів
Перед використанням набір витримати при кімнатній температурі протягом 30 min (хв).
Приготування робочого реагенту РР: змішати 4 об’єми Р1 (буфер) + 1 об'єм Р2 (субстрат).
РР стабільний 21 d (доб) при 2-8 ºC або 5 d (доб) при кімнатній температурі 15-25 ºC.
Умови вимірювання:
- довжина хвилі 405 nm (нм)
- кювета з товщиною оптичного шару 1 cm (см)
- температура 25 ºC / 30 ºC / 37 ºC
Референтні величини
Ґрунтуючись на результатах досліджень, проведених лабораторіями, рекомендуємо користуватися нормами, приведеними нижче. Разом з тим, відповідно до правил GLP (Гарної лабораторної практики), кожна лабораторія повинна сама визначити для себе параметри норми, характерні для обстежуваної популяції.
| 1 | 2 | 3 | 4 |
|---|---|---|---|
| 25 ºC | 30 ºC | 37 ºC | |
| Чоловіки до | 6-28 U/l (Од/л) | 8-38 U/l (Од/л) | 11-50 U/l (Од/л) |
| Жінки до | 4-18 U/l (Од/л) | 5-25 U/l (Од/л) | 7-32 U/l (Од/л) |
Комплектація
| 1 | 2 | 3 | 4 |
|---|---|---|---|
| 1.042 | 1.020 | 1.021 | |
| Вміст | 50 визн. | 100 визн. | 500 визн. |
| Р1 | 1 х 40 ml (мл) | 1 х 80 ml (мл) | 1 х 400 ml (мл) |
| Р2 | 1 х 10 ml (мл) | 1 х 20 ml (мл) | 1 х 100 ml (мл) |