Поживне середовище жовтіє під час інкубації, що вказує на наявність живих спор. Умови інкубації залежатимуть від мікроорганізму та стерилізуючого агента:
24 години при температурі 55-62 °C для спор Geobacillus stearothermophilus ATCC 7953, що піддаються обробці парою або плазмою (VH2O2), та 48 годин для обробки формальдегідом;
48 годин при температурі 35-39 °C для спор Bacillus atrophaeus ATCC 9372, що піддаються обробці сухим жаром або оксидом етилену;
для спор Bacillus subtilis ATCC 35021, що піддаються обробці парою за низьких температур;
та для спор Bacillus pumilus ATCC 27142, що піддаються обробці гамма-випромінюванням.
Рекомендовано інкубувати при температурі 37/60 °C в інкубаторі BIONOVA® IC10/20.