Принцип методу
Сечовина з діацетилмонооксимом в кислому середовищі в присутності тіосемікарбазіда і тривалентного заліза утворює забарвлений комплекс. Інтенсивність забарвлення пропорційна концентрації сечовини в пробі.
Клінічне значення
Сечовина є кінцевим результатом метаболізму білків. Утворюється в печінці при їх руйнуванні. Підвищений рівень сечовини в крові спостерігається при захворюванні нирок, серця, шлунковокишкових кровотечах, злоякісних пухлинах сечовивідних шляхів та передміхурової залози, хворобі Аддісона, посиленому розпаду білків, шоці, зневодненні, дієтах з надлишковим рівнем білків.
Зниження сечовини в крові буває фізіологічним при вагітності.
В сечі збільшення сечовини відбувається у хворих на злоякісну анемію, у наслідку гіперпротеїнової дієти, після прийому саліцилатів, при отруєнні фосфором; зниження – у хворих нефритом, ацидозом, на паренхіматозну жовтільницю, гостру дистрофію печінки, прогресуючим цирозом.
Клінічний діагноз не повинен базуватися на одному показникові, необхідно враховувати клінічні та інші лабораторні дані.
Склад набору
- Реагент 1. Діцетилмонооксим - 40 mmol/l (ммоль/л).
- Реагент 2. Окислювач: сірчана кислота 7.2 mol/l (моль/л).
- Реагент 3. Тіосемікарбазида гідрохлорид - 30 mmol/l (ммоль/л).
- Реагент 4. Залізо хлорне - 1 mmol/l (ммоль/л).
- Стандарт. Водний розчин сечовини. Точна концентрація вказана в сертифікаті якості.
- Інструкція з використання
- Сертифікат якості.
Аналітичні характеристики
- Лінійність вимірювального діапазону: 2.5-25 mmol/l (ммоль/л). Відхилення від лінійності не перевищує 5%. Якщо отримані результати були більше, ніж межі лінійності, розведіть зразки 1:1 (в два рази) NaCl 9 g/l (г/л) та помножте результат на два.
- Чутливість не менш 2.5 mmol/l (ммоль/л).
- Коефіцієнт варіації результатів визначень – не більш 5%.
Матеріал для дослідження
- Сироватка та плазма крові (не використовувати амонієву сіль гепарину та фториди). Досліджувані сироватки або плазми повинні бути ретельно відокремлені від формених елементів крові не пізніше, ніж через 1 h (год) після взяття крові. Уникайте використання мутних, ліпідних та гемолітичних зразків.
- Добова сеча: розвести зразок 1:49 (в 50 разів) дистильованою водою. Перемішати. Помножити результат на 50 (коефіцієнт розведення).
Перелік необхідного устаткування
- Спектрофотометричне або колориметричне обладнання з довжиною хвилі 540 (540-560) nm (нм).
- Відповідні кювети з товщиною оптичного шару 1 cm (см).
- Водяна баня.
- Загальне лабораторне обладнання.
Прим: Адаптації до напівавтоматичних і автоматичних приладів надаються за запитом.
Підготовка реагентів
Перед використанням набір витримати при кімнатній температурі протягом 30 min (хв).
Приготування робочого розчину РР.
Змішати у строго вказаній послідовності: Р1-10 ml (мл), Р2-10 ml (мл), Р3-2 ml (мл), Р4-0,4 ml (мл). Негайно додати 58 ml (мл) дистильованої води і перемішати.
Робочий розчин стабільний 7 d (доб) при температурі зберігання 2-8 °С. Зберігати в щільно закритому посуді.
Можна змішувати кратні обсяги реагентів, не змінюючи їх співвідношення.
Умови вимірювання:
- довжина хвилі 540 (540-560) nm (нм)
- кювета з товщиною оптичного шару 1 cm (см)
- температура 100 ºC
Референтні величини
Ґрунтуючись на результатах досліджень, проведених лабораторіями, рекомендуємо користуватися нормами, приведеними нижче. Разом з тим, відповідно до правил GLP (Гарної лабораторної практики), кожна лабораторія повинна сама визначити для себе параметри норми, характерні для обстежуваної популяції.
Нормальні рівні сечовини становлять:
- В сироватці, плазмі крові 2.5-8.3 mmol/l (ммоль/л).
- В сечі 333-583 mmol/d (ммоль/доб).
Комплектація
| 1 | 2 |
|---|---|
| 2.048 | |
| Вміст | 100 визн. |
| Р1 | 1 х 50 ml (мл) |
| Р2 | 1 х 50 ml (мл) |
| Р3 | 1 х 10 ml (мл) |
| Р4 | 1 х 2 ml (мл) |
| Стандарт | 1 х 1 ml (мл) |