НАЗНАЧЕНИЕ
Набор используется для определения активности аланинаминотрансферазы в сыворотке крови человека в клинико-диагностических, биохимических лабораториях и научно-исследовательской практике.
Набор рассчитан на 60 макроопределений или 250 микроопределений (с учетом холостых проб).
Линейность должна обеспечиваться в диапазоне от 0,1 мкмоль/(чмл) до 2,5 мкмоль/(чмл) (от 0,028 мккат/л до 0,7 мккат/л).
Коэффициент вариации определения – не более 6 %.
Хранение набора – при температуре от плюс 2 °С до плюс 8 °С.
Гарантийный срок годности набора – 12 месяцев со дня изготовления.
Набор предназначен для применения in vitro профессионально обученным лаборантом.
ПРИНЦИП МЕТОДА
В результате аминирования 2-оксоглутаровой кислоты L-аланином, которое происходит под действием аланинаминотрансферазы, образуются L-глутаминовая и пировиноградная кислоты. Определение основано на измерении оптической плотности 2,4-динитрофенилгидразонов 2-оксоглутаровой и пировиноградной кислот в щелочной среде. Поскольку гидразон пировиноградной кислоты имеет более высокий коэффициент молярной экстинции, наблюдается прямо пропорциональная зависимость оптической плотности реакционного раствора от активности фермента.
СОСТАВ НАБОРА
- Субстратно-буферный раствор АлАТ – 1 флакон с (50±2) мл;
- фосфатный буфер (0,100±0,005) моль/л,
- D,L-альфа-аланин (0,20 ± 0,01) моль/л,
- 2-оксоглутаровая кислота (2,0 ± 0,1) ммоль/л.
- Стоп-реагент – 1 флакон с (50±2) мл;
- 2,4-динитрофенилгидразин (1,00 ± 0,05) ммоль/л
- Калибровочный раствор – 1 ампула с (5,0±0,5) мл;
- пировинограднокислого натрия (2,0±0,1) ммоль/л, (220 ± 11) мкг/мл, (что соответствует 176 мкг/мл пировиноградной кислоты)
- Гидроокись натрия раствор (4,0 ± 0,2) моль/л или сухой – 1 флакон с (50 ± 2) мл или (8,00 ± 0,32) г. (ОСТОРОЖНО, едкое ВЕЩЕСТВО!)